"PL45 epithelioid cells人胰腺導管腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! BT20細胞系相關產品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞 GM03190細胞系相關產品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞 MLTC-1細胞系相關產品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞 細胞生長:貼壁 PL45 epithelioid cells人胰腺導管腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數,細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 JJN-3細胞系相關產品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞 T98-G細胞系相關產品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞 OV-CA 432細胞系相關產品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞 SW 527細胞系相關產品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞 H184A1細胞系相關產品:28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 PL45 epithelioid cells人胰腺導管腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 U-373MG ATCC細胞系相關產品:IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞 NCIH345細胞系相關產品:COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 Hs-600-T細胞系相關產品:H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞 58F細胞系相關產品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞 MDBK (NBL-1)細胞系相關產品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞 KU-812細胞系相關產品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 RPMI.8226細胞系相關產品:NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞 NCI-H510細胞系相關產品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞 P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關產品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞 NCI-H295細胞系相關產品:NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞 PL45 epithelioid cells人胰腺導管腺癌細胞系 B16/F0細胞系相關產品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞 WM 266-4細胞系相關產品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 HepG2細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞 Caco-2/BBe 1細胞系相關產品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞 A2780S細胞系相關產品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞 P116細胞系相關產品:MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞 HEL9217細胞系相關產品:Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞 PaCa2細胞系相關產品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞 H9c2 (2-1)細胞系相關產品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞 Sp2/0細胞系相關產品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 MCF7/WT細胞系相關產品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞 MDCK-2細胞系相關產品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 WEHI3細胞系相關產品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞 PLC-PRF-5細胞系相關產品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞 Okayama University Medical School-23細胞系相關產品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞 SKLU-1細胞系相關產品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞 PE/CA-PJ-34細胞系相關產品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞 OCI Ly1細胞系相關產品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞 ROS17/2.8細胞系相關產品:WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞 CemT4細胞系相關產品:HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞 KLE細胞系相關產品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞 F98細胞系相關產品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞 HR8348細胞系相關產品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞 HCT 15細胞系相關產品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞 8305C細胞系相關產品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞 MeT5A細胞系相關產品:OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞 T-T細胞系相關產品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞 MDAMB468細胞系相關產品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞 T-47-D細胞系相關產品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞 LY細胞系相關產品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞 HOS (TE85)細胞系相關產品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞 HTR8svn細胞系相關產品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞 EFM192A細胞系相關產品:X63-Ag8-653細胞、HSC(Human Schwann)細胞、SU-DHL-8細胞 NG108-15細胞系相關產品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞 NTERA-2/D1細胞系相關產品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞 High 5細胞系相關產品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞 SNU-398細胞系相關產品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞 MB49細胞系相關產品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞 C643細胞系相關產品:VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞 OV 2008細胞系相關產品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞 PLC-8024細胞系相關產品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞 ssMCF7細胞系相關產品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞 TOV21細胞系相關產品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞 TO 175.T細胞系相關產品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞 Mel624細胞系相關產品:NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞 McG-1細胞系相關產品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞 NCIH2141細胞系相關產品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞 HCCLM3細胞系相關產品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞 SUM-52細胞系相關產品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞 Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產品:Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞 JHH7細胞系相關產品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞 PL45 epithelioid cells人胰腺導管腺癌細胞系 RPE-1細胞系相關產品:Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產品:SK-MES1細胞、HMSC細胞、HN 4細胞 F442A細胞系相關產品:TO 175.T細胞、K-1735細胞、MTC-TT細胞 HS5細胞系相關產品:huH 1細胞、SK-MES-1細胞、Clone 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