"GBC-SD Cell:人膽囊癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：GBC-SD 細胞株是王展明等２０００年從一位６１歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。 細胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形。 分泌CEA和CA１９-９。倍增時間大約為２１.４小時。 可移植到裸鼠。 生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。
Clone M-3細胞系相關產品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
EB-3細胞系相關產品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
COV434細胞系相關產品：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關產品：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
GBC-SD Cell:人膽囊癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HN-6細胞系相關產品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
JIMT-1細胞系相關產品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
OCILY7細胞系相關產品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
MDAPC2B細胞系相關產品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
細胞生長特性：貼壁生長
GBC-SD Cell:人膽囊癌細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
M-O7e細胞系相關產品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關產品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
R1800[RA]細胞系相關產品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
Mv 1 Lu細胞系相關產品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
Monomac-1細胞系相關產品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
HNE-3細胞系相關產品：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
SMMC-7721細胞系相關產品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
GBC-SD Cell:人膽囊癌細胞系
NW38細胞系相關產品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
Mel-MeWo細胞系相關產品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
Human Kidney-2細胞系相關產品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
HOP62細胞系相關產品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關產品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
KU-19-19細胞系相關產品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
PC-9S1細胞系相關產品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
SSP-25細胞系相關產品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
CHO細胞系相關產品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
CHO細胞系相關產品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
SCL I細胞系相關產品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
VP267細胞系相關產品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
MLE-12細胞系相關產品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
NKM1細胞系相關產品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
Panc04.03細胞系相關產品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
UMUC1細胞系相關產品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
Hep-3B細胞系相關產品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
Jurkat-77細胞系相關產品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
P3HR1-BL細胞系相關產品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
A2008細胞系相關產品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
NCIH2291細胞系相關產品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
AN3 CA細胞系相關產品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
LU-65M細胞系相關產品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
VM Cub 1細胞系相關產品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
SNU407細胞系相關產品：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
CTLL-2細胞系相關產品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
HSC3細胞系相關產品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
SK-Mel 2細胞系相關產品：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
USMC細胞系相關產品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
B6Tert-1細胞系相關產品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
HVSMC細胞系相關產品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
OVCA432_Bast細胞系相關產品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
NCIH209細胞系相關產品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
HCC-1937細胞系相關產品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
MDA-134細胞系相關產品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
G292細胞系相關產品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
H1395細胞系相關產品：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
MPC11細胞系相關產品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
NR8383.1細胞系相關產品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
BMF細胞系相關產品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
BAC1.2F5細胞系相關產品：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
GBC-SD Cell:人膽囊癌細胞系
IOSE29細胞系相關產品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
MC-3T3-E1細胞系相關產品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
RPMI6666細胞系相關產品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
HCC-94細胞系相關產品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
JB6 Cl 30細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
D-341Med細胞系相關產品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
MDA-MB-453細胞系相關產品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
H647細胞系相關產品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
EFM-192A細胞系相關產品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
MF2059細胞系相關產品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
OVTOKO細胞系相關產品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關產品：IGROV細胞、UMNSAH-DF 1細胞、DMS 79細胞
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