【產(chǎn)品名稱】：桑葉提取物Mulberry Leaf Extract

【產(chǎn)品別名】：鐵扇子 桑葉提取物 桑葉多糖 桑葉黃酮 桑葉DNJ脫氧野尻霉素

【英文名稱】：Mulberry Leaf Extract

【使用部位】：?？浦参锷orus alba L. 的葉
【主要成分】：黃酮、生物堿、多糖等多種活性物質(zhì)

【植物來源】：桑葉，落葉喬木，高3～7米或更高，通常灌木狀，植物體含乳液。樹皮黃褐色，枝灰白色或灰黃色，細(xì)長(zhǎng)疏生，嫩時(shí)稍有柔毛。葉互生;卵形或橢圓形，長(zhǎng)5～10厘米，最長(zhǎng)可達(dá)20厘米，寬5～11厘米，先端銳尖，基部心臟形或不對(duì)稱，邊緣有不整齊的粗鋸齒或圓齒;葉柄長(zhǎng)1.5～4厘米；托葉披針形，早落?；▎涡?，雄雌異株；花黃綠色，與葉同時(shí)開放；雄花成柔荑花序;雌花成穗狀花序；萼片4裂；雄花有雄蕊4：雌花無花柱，柱頭2裂，向外卷。聚合果腋生，肉質(zhì)，有柄，橢圓形，長(zhǎng)1～2.5厘米，深紫色或黑色，少有白色的?；ㄆ?～5月。果期6～7月。全國(guó)各地有栽培。以江蘇、浙江一帶為多。本信息是由的賈杰編輯整理。

【成分性質(zhì)】：葉含蕓香甙槲皮素、異槲皮甙、槲皮素-3-三葡萄糖甙、微量的β-谷甾醇β-D-葡糖甙、蛇麻脂醇、內(nèi)消旋肌醇、昆蟲變態(tài)激素牛膝甾酮和蛻皮甾酮、溶血素、綠原酸。揮發(fā)油成分中有乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、己酸、異己酸、水楊酸甲酯、愈創(chuàng)木酚、酚、鄰苯甲酚、間苯甲酚、丁香油酚等。又含草酸、延胡索酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、棕櫚酸、棕櫚酸乙酯、三十一烷、羥基香豆精、蔗糖、果糖、葡萄糖、天門冬氨基酸和各氨酸等氨基酸。并含維生素C、谷胱甘肽、葉酸、5-甲酰四氫葉酸、維生素B1、維生素B2、腺嘌呤、膽堿、胡蘆巴堿，以及銅、鋅、硼、錳等。
槲皮素： 分子式C15H10O7，分子量302.25，mp 316℃。含水物分子式C15H9O7·2H2O，黃色結(jié)晶，mp 313℃～314℃ (分解)。溶于熱乙醇 (1：23)、冷乙醇 (1：300)，可溶于甲醇、醋酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿中，幾乎不溶于水。

【存儲(chǔ)條件】：避光儲(chǔ)存于密封容器中

【原料采購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)】：

【產(chǎn)品規(guī)格】桑葉提取物有常用的規(guī)格有桑葉多糖、桑葉黃酮、DNJ。

【檢測(cè)方法】：保健食品中水溶性粗多糖的測(cè)定方法

1. 范圍

本方法規(guī)定了保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測(cè)定方法。

本方法適用于保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測(cè)定。

本方法最低檢出濃度：5.0mg/L。

本方法線性范圍：5.0ug/mL—200ug/mL。

2. 原理

食品中分子量>10000的高分子物質(zhì)在80%乙醇溶液中沉淀，與水溶液中單和低聚糖分離，用堿性二價(jià)銅試劑選擇性的從其它高分子物質(zhì)中沉淀具有葡聚糖結(jié)構(gòu)的水溶性多糖 ，用苯酚-硫酸反應(yīng)以碳水化合物形式比色測(cè)定其含量，其顏色強(qiáng)度與水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)參照物并以此計(jì)算食品中水溶性粗多糖含量。

原理 多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測(cè)定。

3．試劑

本方法所用試劑除特殊注明外，均為分析純；所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。

3.1乙醇溶液(80%):20mL水中加入無水乙醇80mL，混勻。

3.2氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取100g氫氧化鈉，加水溶解并稀釋至1L，加入固體無水硫酸鈉至飽和，備用。

3.3銅試劑儲(chǔ)備液:稱取3.0gCuSO4.5H2O，30.0g檸檬酸鈉，加水溶解并稀釋至1L， 混勻備用。

3.4銅試劑溶液：取銅儲(chǔ)備液50mL，加水50mL，混勻后加入固體無水硫酸鈉12.5g并使其溶解。臨用新配。

3.5洗滌劑：取水50mL，加入10mL銅試劑溶液，10mL氫氧化鈉溶液，混勻，臨用新配。

3.6硫酸溶液（10%）：取100mL濃硫酸加入到800mL左右水中，混勻，冷卻后稀釋至1L。

3.7苯酚溶液（50g/L）：稱取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀釋至100mL，混勻。溶液置冰箱中可保存一月。

3.8葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:精密稱在硫酸干燥器中干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)0.5000g，加溶解，并定容至50mL，混勻，置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡萄糖。

3.9葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混勻，置冰  箱中保存。此溶液每毫升含葡萄糖0.10mg。

4．儀器

4.1分光光度計(jì)

4.2離心機(jī)

4.3旋轉(zhuǎn)混勻器

5. 分析步驟

5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:  

精密吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL(相當(dāng)于葡萄糖，0.010，0.020，0.040，0.060，0.080，0.10mg)分別置于25mL比色管中，準(zhǔn)確補(bǔ)充水至2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，小心加入濃硫酸10.0mL，于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻后用分光光度計(jì)在485nm波長(zhǎng)處以試劑空白溶液為參比，1cm比色皿測(cè)定吸光度值。以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5.2試樣處理

5.2.1試樣提取:稱取混合均勻的固體試樣2.0g，置于100mL容量瓶中，加水80mL左右，于水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補(bǔ)加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液，收集余下濾液供沉淀多糖。

5.2.2沉淀粗多糖:精密取5.2.1濾液5.0mL或液體試樣5.0mL，置于50mL離心管中，加入無水乙醇20mL，混勻5min.，以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘?jiān)?0%乙醇溶液數(shù)毫升洗滌，離心后棄上清液，反復(fù)3—4次操作。殘?jiān)盟芙獠⒍ㄈ葜?.0mL，混勻，供沉淀葡聚糖。

5.2.3沉淀葡聚糖:精密取5.2.2溶液2mL置于20mL離心管中，加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0mL，銅試劑溶液2.0mL，沸水浴中煮沸2min.，冷卻后以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘?jiān)孟礈煲簲?shù)毫升洗滌，離心，棄去上清液，反復(fù)3次操作，殘?jiān)?00mL/L硫酸溶液2.0 mL溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量中，加水稀釋至刻度，混勻。此溶液為試樣測(cè)定液。

5.3試樣測(cè)定:精密吸取試樣測(cè)定液2.0 mL置于25 mL比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0 mL，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻后，小心加入濃硫酸10.0mL后于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻至室溫，用分光光度計(jì)在485nm波長(zhǎng)處，以試劑空白為參比，1cm比色皿測(cè)定吸光度值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出葡萄糖含量，計(jì)算試樣中水溶性粗多糖含量。同時(shí)作試樣空白實(shí)驗(yàn)。

5．4 分析結(jié)果表述

試樣中水溶性粗多糖的含量按式（5.4.1）計(jì)算。

5．4．1計(jì)算

式中:    x—試樣中水溶性粗多糖含量(以葡萄糖計(jì))，mg/g;

         m1---試樣測(cè)定液中葡萄糖的質(zhì)量，mg;

         m2---試樣空白液中葡萄糖質(zhì)量，mg;

         m---試樣質(zhì)量，g;

         V1---試樣提取液總體積，mL;

         V2---沉淀粗多糖所用試樣提取液體積，mL;

         V3---粗多糖溶液體積，mL;

         V4---沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液體積，mL;

         V5 --試樣測(cè)定液總體積， mL;

         V6---測(cè)定用試樣測(cè)定溶液體積，mL。  

5．4．2 結(jié)果表示

    計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

   6. 技術(shù)參數(shù)

       回收率：不同食品中不同濃度加標(biāo)回收的回收率為87.8～110.8%。

精密度：同一試樣10次測(cè)定結(jié)果的RSD為5.8%。

干擾因素：測(cè)定過程中避免碳水化合物的玷污干擾。  

【檢測(cè)方法】：桑葉黃酮 保健食品標(biāo)準(zhǔn)

C1總黃酮含量測(cè)定

C1.1試劑

C1.1.1聚酰胺粉

C1.1.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取5.0mg蘆丁，加甲醇溶解并定容至100ml，即得50ug/ml

C1.1.3乙醇：分析醇

C1.1.4甲醇：分析醇

C1.1.5分析步驟

C1.2樣品處理：稱取一定量的樣品，加乙醇定容至25ml，搖勻后，超聲提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸發(fā)皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上揮去乙醇，然后轉(zhuǎn)入層吸柱。先用20ml苯洗，苯液棄取，然后用甲醇洗脫黃酮，定容至25ml，此液于波長(zhǎng)360nm測(cè)定吸收值，同時(shí)以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，求回歸方程，計(jì)算樣品中總黃酮含量。

C1.3蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線

吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，搖勻，于波長(zhǎng)360nm比色。求回歸方程，計(jì)算樣品中總黃酮含量。

C1.4計(jì)算和結(jié)果表示：

X=A×V2/V1/M/1000

式中：X-樣品中總黃酮含量，mg/100g

B-由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得被測(cè)液中黃酮量，ug

M-樣品質(zhì)量，g；

V1-測(cè)定用樣品體積，ml

V2-樣品定容總體積，ml

【檢測(cè)方法】：DNJ(脫氧野尻霉素） 保健食品標(biāo)準(zhǔn)

含量測(cè)定：1-DNJ>1%-30%（HPLC-ELSD 法）

   色譜條件:

色譜柱：SUPELCOSIL LC-NH2 5 µ，25 cm×4.6 mmID；

流動(dòng)相：乙腈-水(80:20)；

流速：0．8mL·min-1；柱溫：40℃；ELSD

氣化室溫度 100℃；

氮?dú)饬魉伲?.5 SLPM。

對(duì)照品溶液的制備：

分別精密稱取對(duì)照品 1-脫氧野尻霉素 11.40 mg，用甲醇溶解并定容至 10mL 容量瓶，搖勻，即得。

供試品溶液的制備:

 取本品 0.15 g，精密稱取，置于具濾紙的漏斗上，用乙醇約 20ml 分?jǐn)?shù)次洗滌，濾紙及殘?jiān)鼡]干乙醇，置錐形瓶中，精密加入 30%乙醇 50ml，稱定重量，加熱回流 30min，放冷，再稱定重量，用 30%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法:

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 5μl，測(cè)定，即得。

【物流時(shí)間】：快遞或物流,國(guó)內(nèi)快遞（百世、中通、申通、德邦、順豐）三天內(nèi)到達(dá),物流五天內(nèi)到達(dá).報(bào)價(jià)一般均含國(guó)內(nèi)運(yùn)輸費(fèi)用

【產(chǎn)品包裝】：1公斤/包；10公斤/箱；25公斤/桶，也可根據(jù)客戶要求包裝