產(chǎn)品名稱
檸檬酸鈉緩沖液粉劑 (0.01mol/L, pH6.0)
Sodium Citrate Buffer with Powder (0.01mol/L, pH6.0)
產(chǎn)品規(guī)格
PH9017-1L
PH9017-2L
試劑保存
室溫密封保存,有效期 12 個月。
產(chǎn)品簡介
細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致細胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部 分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假 陰性染色結(jié)果。所以要求在進行免疫組化染色時,需要先進行抗原修復或暴露,即將固定時分子之間所形成的 交聯(lián)破壞,而恢復抗原的原有空間形態(tài)。從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高檢測的準確性。
檸檬酸鈉緩沖液 0.01mol/L, pH6.0 是一種常用的抗原修復液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用 多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復??梢杂行コ╊惞潭ㄔ噭е碌牡鞍字g的交聯(lián),充分 暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。 通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復可以提高石蠟切片 的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當冰凍切片免疫染色效果不理想時,考慮進行 抗原修復。
按照每個片子需要 10ml 抗原修復液計算,1L 抗原修復液可以用于 100 個樣本的抗原修復。
使用參考
本產(chǎn)品是干粉形式,使用前用去離子水或蒸餾水按產(chǎn)品規(guī)格溶解至 1L 或 2L,即可使用。
1. 對于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1 次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸餾水洗 2 次,每次 3-5min。
b. 抗原修復:將切片浸泡在檸檬酸修復液中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內(nèi), 的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸修復液使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使 用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大 約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫 染色步驟。
2. 對于冰凍切片: 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 min。將切片浸泡在檸檬酸修復液中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以 控制在 10-20 min 內(nèi),的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸修復液使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過 多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可 進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴手套操作。
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