檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠 IL-1β抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IL-1β與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。
檢測(cè)類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測(cè)樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠 IL-1β檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。
靈敏度:3.8 pg/mL
檢測(cè)范圍:15.6 - 1,000 pg/mL
回收率范圍:69-102%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
白細(xì)胞介素 1(IL-1) 蛋白家族包含經(jīng)典成員 IL-1α、 IL-1β和 IL-1ra, 以及 IL-18、IL-33 和 IL-1F5-10。 IL-1α和 IL-1β結(jié)合于相同的細(xì)胞表面受體, 共享生物學(xué)功能。除了皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、 一些上皮細(xì)胞以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些細(xì)胞之外, 健康小鼠未刺激的細(xì)胞不產(chǎn)生 IL-1。 但是, 作為對(duì)炎癥物質(zhì)、 感染或微生物內(nèi)毒素的應(yīng)答, 巨噬細(xì)胞以及其他多種細(xì)胞會(huì)大量產(chǎn)生 IL-1。 在免疫應(yīng)答與炎癥反應(yīng)、 骨重建、 發(fā)熱、 糖代謝、 生長(zhǎng)激素/ IGF-1 的生理學(xué)過(guò)程中, IL-1β起著關(guān)鍵作用。 在一系列的病理?xiàng)l件下,包括敗血癥、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 炎性腸病、 急性和慢性髓性白血病、 胰島素依賴型糖尿病、 動(dòng)脈粥樣硬化、 神經(jīng)損傷以及衰老有關(guān)的疾病, 一直伴有 IL-1 的異常或持續(xù)產(chǎn)生。
IL-1α和 IL-1β具有結(jié)構(gòu)上相關(guān)的多肽, 在氨基酸水平上的同源性大約為 25%。 它們均被合成為 31 kDa 大小的前體, 然后裂解為成熟的蛋白質(zhì), 分子量大約為 17.5 kDa。 Caspase-1/ICEI 裂解 IL-1β前體是炎癥反應(yīng)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟。 IL-1α和IL-1β都不含有典型的疏水性信號(hào)肽, 但有證據(jù)表明這些因子可通過(guò)非經(jīng)典通路分泌。 一部分未加工的 IL-1α可在細(xì)胞膜上出現(xiàn), 并可能存有生物學(xué)活性。與 IL-1α前體不同, IL-1β前體與成熟體相比幾乎不具備生物學(xué)活性。 未加工和成熟的 IL-1β均可從細(xì)胞輸出。
IL-1α和 IL-1β通過(guò)與 IL-1ra 結(jié)合的免疫球蛋白超家族受體發(fā)揮作用。 表達(dá) 80kDa 的跨膜 I 型受體(IL-1 RI) 的細(xì)胞包括: T 細(xì)胞、 成纖維細(xì)胞、 角質(zhì)細(xì)胞、 內(nèi)皮細(xì)胞、 滑液內(nèi)層細(xì)胞、 軟骨細(xì)胞和肝細(xì)胞。 表達(dá) 68kDa 的跨膜 II 型受體(IL-1 RII)的細(xì)胞包括: B 細(xì)胞、 中性粒細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。 這兩種 IL-1 受體的胞外域具有大約 28%的同源性, 但顯著差異則體現(xiàn)在其胞內(nèi)域; II 型受體的胞內(nèi)域僅有 29 個(gè)氨基酸,而 I 型受體的胞內(nèi)域卻有 217 個(gè)氨基酸。 IL-1 RII 對(duì)于 IL-1 不產(chǎn)生信號(hào), 可能做一個(gè)誘騙受體減弱 IL-1 功能。 IL-1 受體輔助蛋白(IL-1 RAcP) 與 IL-1 RI 相關(guān), 為 IL-1RI 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需。 IL-1ra 是一個(gè)分泌性分子, 起到 IL-1 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的作用。 在人血漿、 關(guān)節(jié)滑液以及多種人細(xì)胞系的條件培養(yǎng)基中可以檢出可溶性 IL-1RI 和 IL-1 RII。 此外, 類似于可溶性 IL-1 RII 的 IL-1 結(jié)合蛋白能夠由牛痘和牛痘病毒編碼產(chǎn)生。
關(guān)鍵字: 小鼠白介素1(IL-1) beta elisa試劑盒
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