T4 RNA Ligase

T4 RNA Ligase，即T4 RNA連接酶，是一種ATP-依賴的可以催化單鏈RNA、單鏈DNA或單核苷酸分子間或分子內5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵的酶。
T4 RNA Ligase主要用于RNA和RNA之間的連接，連接時需要5'磷酸基團和3'羥基的存在。不僅可以進行RNA分子間的連接，也可以進行RNA分子(最短8個堿基)的環(huán)化連接。
T4 RNA Ligase可以用于RNA和單核苷酸之間的連接，單核苷酸必須為5'和3'均磷酸化的形式，此時常用于RNA的3'末端標記。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和RNA之間的連接。當DNA提供5'磷酸基團，RNA提供3'羥基時，連接效率較高；當DNA提供3'羥基，RNA提供5'磷酸基團時，連接效率非常低。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和DNA之間的連接，但連接效率非常低。主要用于DNA的環(huán)化連接，例如5' RACE中的cDNA環(huán)化。DNA和DNA之間的連接盡管可以進行，但比較困難。
用途：用RNA 3'末端標記；RNA和RNA分子間連接；寡核苷酸的環(huán)化；tRNA修飾；5' RACE中寡核苷酸連接到cDNA單鏈；在蛋白質特定位點引入非天然氨基酸。
來源：由大腸桿菌表達，表達基因的來源為T4嗜菌體。
活性定義：37℃30分鐘內，催化1 nmol 5'-[³²P]-(A)_12-18成為磷酸酶不能消化的環(huán)形產物所需的酶量定義為1個活性單位。
活性檢測條件：50mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl₂，10mM DTT，1mM ATP，10μM 5'-[³²P]-(A)_12-18(10μM in 5'-termini)。
純度：不含DNA內切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷酸酯酶。
酶儲存溶液：10mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，50mM KCl，0.1mM EDTA，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃)，100mM MgCl₂，100mM DTT。
失活或抑制：70℃加熱10分鐘可使T4 RNA Ligase失活。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項： 
反應體系中需加入的ATP量取決于連接反應的類型；在最終反應體系中BSA推薦濃度為0.1mg/ml。
使用時宜存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1. T4 RNA Ligase的具體使用方法請自行參考相關文獻資料進行。