T4 RNA Ligase

T4 RNA Ligase，即T4 RNA連接酶，是一種ATP-依賴的可以催化單鏈RNA、單鏈DNA或單核苷酸分子間或分子內(nèi)5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵的酶。
T4 RNA Ligase主要用于RNA和RNA之間的連接，連接時(shí)需要5'磷酸基團(tuán)和3'羥基的存在。不僅可以進(jìn)行RNA分子間的連接，也可以進(jìn)行RNA分子(最短8個堿基)的環(huán)化連接。
T4 RNA Ligase可以用于RNA和單核苷酸之間的連接，單核苷酸必須為5'和3'均磷酸化的形式，此時(shí)常用于RNA的3'末端標(biāo)記。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和RNA之間的連接。當(dāng)DNA提供5'磷酸基團(tuán)，RNA提供3'羥基時(shí)，連接效率較高；當(dāng)DNA提供3'羥基，RNA提供5'磷酸基團(tuán)時(shí)，連接效率非常低。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和DNA之間的連接，但連接效率非常低。主要用于DNA的環(huán)化連接，例如5' RACE中的cDNA環(huán)化。DNA和DNA之間的連接盡管可以進(jìn)行，但比較困難。
用途：用RNA 3'末端標(biāo)記；RNA和RNA分子間連接；寡核苷酸的環(huán)化；tRNA修飾；5' RACE中寡核苷酸連接到cDNA單鏈；在蛋白質(zhì)特定位點(diǎn)引入非天然氨基酸。
來源：由大腸桿菌表達(dá)，表達(dá)基因的來源為T4嗜菌體。
活性定義：37℃30分鐘內(nèi)，催化1 nmol 5'-[³²P]-(A)_12-18成為磷酸酶不能消化的環(huán)形產(chǎn)物所需的酶量定義為1個活性單位。
活性檢測條件：50mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl₂，10mM DTT，1mM ATP，10μM 5'-[³²P]-(A)_12-18(10μM in 5'-termini)。
純度：不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷酸酯酶。
酶儲存溶液：10mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，50mM KCl，0.1mM EDTA，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃)，100mM MgCl₂，100mM DTT。
失活或抑制：70℃加熱10分鐘可使T4 RNA Ligase失活。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)： 
反應(yīng)體系中需加入的ATP量取決于連接反應(yīng)的類型；在最終反應(yīng)體系中BSA推薦濃度為0.1mg/ml。
使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1. T4 RNA Ligase的具體使用方法請自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料進(jìn)行。