真菌總蛋白質微量提取試劑盒

產品及特點本產品專門用于快速提取微量酵母蛋白用于 SDS-PAGE 凝膠電泳和 Western 印跡分析。本產品結合玻璃珠破壁和化學法破壁兩種方法，適合于 各種形態(tài)的各種酵母材料。本產品的其主要特點是：

1. 破壁效率高，能達到 80-90%。

2. 可以處理各種酵母樣品。

3. 操作簡單，得到的裂解液可以直接用于 SDS-PAGE 和 Western 印跡分 析。 
規(guī)格及成分 成 份 編 號 50 次小紙盒包裝
溶液 A LM81202a 100 mL
溶液 B 成分一 LM81202b1 50 mL
溶液 B 成分二 LM81202b2 1.5 g
酸洗玻璃珠，400μm LM100307C 5 g
使用手冊 LM81202sc 1 份

運輸及保存 常溫運輸保存，但溶液 B 成分二需-20℃保存，有效期一年。

自備試劑 酵母培養(yǎng)基 

使用方法準備工作：將溶液 B 成分二（干粉）全部加到 50 mL 溶液 B 成分一中，充分搖晃使之全部溶解，成為溶液 B，然后分裝成小份（體積根據每次實驗的樣品數決定）并放-20℃長期保存。

1、 將酵母細胞接種到 5 mL YPD 培養(yǎng)基中，30℃搖晃（250rpm/分鐘）過夜培養(yǎng)使其 OD600 達到 0.5～2.0。

2、 把酵母細胞培養(yǎng)物轉到裝有 2 mL 預冷溶液 A 的 10-15 mL 離心管中，混勻。

3、 4℃ 5000g 離心 5 分鐘沉淀酵母細胞，吸出上清液。

4、 用 30 μL 溶液 B 懸浮酵母細胞，并快速轉移到 1.5 mL 塑料離心管中。

5、 100℃下保溫 3 分鐘，使蛋白酶失活，樣品存放于-20℃。

6、 加入 0.1g 的玻璃珠。

7、 在旋渦振蕩器上劇烈振蕩混合 2-10 分鐘。

8、 加入 70 μL 溶液 B，稍加振蕩，置 100℃保溫 1 分鐘。

9、 取 5-20 μL 抽提液上樣直接進行 SDS-PAGE 凝膠電泳。

注：若蛋白濃度較高，細胞破裂后可用多余溶液 B 適當稀釋后再電泳。