蛋白膠中量回收試劑盒
產(chǎn)品及特點十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)不僅可用于檢測蛋 白質的相對分子質量,而且也是分離純化蛋白質的重要工具之一,隨著蛋白 質技術的微量化,有必要從凝膠中回收蛋白質以用于制備抗體、免疫印跡、 氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的微量蛋 白膠回收法,它具有下列特點: 1. 簡單,不需要復雜而昂貴的儀器(如電洗脫儀)。
2. 適用于變性膠(SDS-PAGE)和非變性膠。
3. 回收率一般在 50-90%之間(跟蛋白質大小,洗脫時間相關)。
4. 跟后續(xù)的實驗兼容,包括 2-D 電泳、質譜測序等。
蛋白膠中量回收試劑盒
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大扁盒包裝
蛋白膠中量純化溶液 A 90403a 5 mL
蛋白膠中量純化溶液 B 90403b 50 mL
20mL 塑料注射器 90403c 5 只
使用手冊 90403sc 1 份
蛋白膠中量回收試劑盒運輸及保存 常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑 無
使用方法
1. 按常規(guī)方法進行變性(SDS-PAGE)或非變性蛋白電泳。
2. 切取含目的蛋白的膠(盡可能地把多余的膠切除,否則會影響回收效率)。 注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建議把樣品分多孔上樣,電 泳后只切其中一個樣孔的膠條進行固定和染色,然后將此膠條放回到在整 體膠中原來的位置,通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對應區(qū) 域,并切下此區(qū)域的膠進行回收。
3. 將切下的膠塊轉移到 1.5 mL 塑料離心管中。
4. 用研磨杵充分將膠塊壓磨成盡可能細小的碎片。
5. 加入 200 uL 溶液 A,4℃搖晃洗脫至少 2-16 小時(過夜)。此時將 溶液 B 放在冰箱預冷。
6. 10,000 g 離心 10 分鐘,轉移上清到新的離心管中,注意不要吸取碎膠。
7. 加入 5 倍體積的預冷的溶液 B,搖晃混勻。
8. -20℃放置至少 10-30 分鐘。
9. 室溫 12,000 g 離心 5-20 分鐘,棄上清。
10.室溫充分晾干,得到的沉淀即為回收的蛋白質?;厥盏牡鞍踪|可溶解在適 當?shù)木彌_液中,可用于后續(xù)實驗(2-D 電泳、質譜測序等)。
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上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質量和完善的售后服務確。