柱式探針純化試劑盒

產品及特點本產品是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標記 的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中，大分子（標記的核酸探針或 Oligo 探針）將繞過層析介質，快速穿透出層析柱，小分子（未參入的核苷酸） 將進入層析介質中，緩慢穿透出層析柱。根據這一時間差而將兩者分開。此 過程的示意圖如下：

1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質，不需要單獨準備每種試劑， 免去用戶自己摸索條件。

2. 適用于 PCR 標記、隨機引物標記、切口平移和填入法標記。

3. 能去掉絕大部分的未標記物、鹽離子等小分子。

4. 足夠 10 次純化使用，每次可以純化 50 uL 的標記反應液。

5. 可用于 DIG、生物素、Cy3、Cy5 等非同位素標記的 DNA 和 RNA 探針 （由于標記分子帶非極性基團，容易進入有機相，因此這些探針不能用傳 統(tǒng)的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法純化）。
規(guī)格及成分 成份 編號 10 次小紙盒包裝
Sephadex G50 介質 121115A 15 mL
0.7 mL 離心柱及管套 121115B 10 套
TE 溶液 80934 10 mL
使用手冊 1 份

運輸及保存 常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑 自備標記探針

使用方法注意：由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低，非常容易吸附到槍頭或 離心管的表面，造成探針的損失，因此好使用硅化的離心管和槍頭。

1. 搖晃 Sephadex G50 介質至均勻，迅速轉移 0.5 mL 到離心柱中，套上 套管（又叫收集管）。

2. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘，Sephadex G50 介質將壓緊在柱子里面。

3. 倒掉套管中的穿透液，再加 0.5mL 的搖晃后得到的 Sephadex G50 介 質，2000rpm 室溫離心 1 分鐘。

4. 經上述步驟會得到體積約為 0.5mL 壓緊后的 Sephadex G50 介質。如 不足，再加入少量的 G50 介質離心，直到體積達到 0.5 mL 左右。倒掉 套管中的穿透液。

5. 在柱子中 Sephadex G50 界面的上面加入 50 uL TE 緩沖液，套上套管， 2000rpm 室溫離心 1 分鐘，測量收集管中穿透液的體積。

6. 重復上步 3-5 次，直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣（50 uL）。

7. 將 50 uL 的標記探針（必須使用 50 uL 樣品。如果沒有 50 uL，需要用 TE 緩沖液或水補足到 50 uL）加到柱子中 Sephadex G50 界面的上面， 套上一個自備的（好是硅化的）離心管。

8. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘，離心管中的穿透液將含標記探針，未參入的 標記物將滯留在介質中。

9. 電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。