柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是基因 miRNA 聚丙烯酰胺凝膠回收產(chǎn) miRNABACK (CAT#:70604)的柱式升級(jí)產(chǎn)品，可用于回收 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的microRNA(miRNA)分子。它具有下列特點(diǎn):
1. 可以回收 15-3000nt 范圍內(nèi)的各種長(zhǎng)度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA片段。
2. 柱式回收法，比沉淀法更見(jiàn)簡(jiǎn)單快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4. 一站式，即開(kāi)即用，操作簡(jiǎn)單，用戶(hù)不需要自備任何試劑。
5. 擴(kuò)容性好，可小規(guī)模操作，也可以大規(guī)模操作。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 50 次包裝
溶液 A LM80203A 15 mL
溶液 B LM80203B 15 mL
溶液 C LM80203C 15 mL
溶液 D LM80203D 40 mL
離心吸附柱 LM60911 50 套
通用洗柱液 LM60408 50 mL
RNA 洗脫液 LM71207 10 mL
使用手冊(cè) LM80203sc 1 份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸,4℃保存(RNA 洗脫液 4℃保存)，有效期一年。
自備試劑 PAGE 膠
使用方法
1. 切取含 miRNA 片段的 PAGE 凝膠（100 mg 左右，盡可能多地把多余的膠切除，否則會(huì)影響回收效率），放入 1.5 mL 塑料離心管中，用移液槍頭盡可能將其搗碎（先在酒精燈上將槍頭的口燒密閉再用于搗碎），搗得越細(xì)越好。
2. 加入 300 uL 溶液 A。
3. 將離心管水平放置并室溫?fù)u晃 3 小時(shí)以讓 miRNA 從 PAGE 凝膠中擴(kuò)散出來(lái)。如果回收的 RNA 片段長(zhǎng)度超過(guò) 100 nt，搖晃時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。提高溫度到45-65℃，RNA 擴(kuò)散速度會(huì)增加。
4. 12000-15000 g 室溫離心 1-2 分鐘，將含 RNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 5mL的塑料離心管中。
5. 加入 300 uL 溶液 B、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均勻?qū)㈦x心管中的溶液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后都先靜置 3 分鐘，然后再12000-15000 g 離心 1 分鐘，倒掉收集管中的液體。
6. 加入 700 uL 通用洗柱液于離心吸附柱中。12000-15000 g 離心 1 分鐘，倒棄收集管中的廢液。
7. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除離心吸附柱中的殘留液體。
8. 將離心吸附柱置于一新的干凈的離心管（自備）中，加入 25-50 uL RNA 洗脫液，靜置 3 分鐘。
9. 12000-15000 g 離心 1 分鐘，離心管底部所得溶液即為純化的 miRNA 溶液，可立即用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者放冰箱長(zhǎng)期保存。
10. 可以 PAGE 電泳檢查回收效率，使用基因的高靈敏的超快核酸銀染試劑（CAT#:81104）染色以節(jié)約 miRNA 樣品的用量。
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