柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒
產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品是基因 miRNA 聚丙烯酰胺凝膠回收產(chǎn) miRNABACK (CAT#:70604)的柱式升級產(chǎn)品,可用于回收 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的microRNA(miRNA)分子。它具有下列特點:
1. 可以回收 15-3000nt 范圍內(nèi)的各種長度的 RNA,包括 100nt 以下的 miRNA片段。
2. 柱式回收法,比沉淀法更見簡單快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4. 一站式,即開即用,操作簡單,用戶不需要自備任何試劑。
5. 擴容性好,可小規(guī)模操作,也可以大規(guī)模操作。
柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒
規(guī)格及成分 成 份 編 號 50 次包裝
溶液 A 80203A 15 mL
溶液 B 80203B 15 mL
溶液 C 80203C 15 mL
溶液 D 80203D 40 mL
離心吸附柱 60911 50 套
通用洗柱液 60408 50 mL
RNA 洗脫液 71207 10 mL
使用手冊 80203sc 1 份
柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒運輸及保存 常溫運輸,4℃保存(RNA 洗脫液 4℃保存),有效期一年。
自備試劑 PAGE 膠
使用方法 1. 切取含 miRNA 片段的 PAGE 凝膠(100 mg 左右,盡可能多地把多余的膠切除,否則會影響回收效率),放入 1.5 mL 塑料離心管中,用移液槍頭盡可能將其搗碎(先在酒精燈上將槍頭的口燒密閉再用于搗碎),搗得越細越好。
2. 加入 300 uL 溶液 A。
3. 將離心管水平放置并室溫搖晃 3 小時以讓 miRNA 從 PAGE 凝膠中擴散出來。如果回收的 RNA 片段長度超過 100 nt,搖晃時間應適當延長。提高溫度到45-65℃,RNA 擴散速度會增加。
4. 12000-15000 g 室溫離心 1-2 分鐘,將含 RNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一個新的 5mL的塑料離心管中。
5. 加入 300 uL 溶液 B、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均勻?qū)㈦x心管中的溶液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后都先靜置 3 分鐘,然后再12000-15000 g 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的液體。
6. 加入 700 uL 通用洗柱液于離心吸附柱中。12000-15000 g 離心 1 分鐘,倒棄收集管中的廢液。
7. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除離心吸附柱中的殘留液體。
8. 將離心吸附柱置于一新的干凈的離心管(自備)中,加入 25-50 uL RNA 洗脫液,靜置 3 分鐘。
9. 12000-15000 g 離心 1 分鐘,離心管底部所得溶液即為純化的 miRNA 溶液,可立即用于后續(xù)實驗或者放冰箱長期保存。
10. 可以 PAGE 電泳檢查回收效率,使用基因的高靈敏的超快核酸銀染試劑(CAT#:81104)染色以節(jié)約 miRNA 樣品的用量。
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上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾#⒃诒本?、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務確。