Cat. No.: EZB-RT2GQ 一、試劑盒簡介 本試劑盒為包含去除基因組DNA的高效DNase的新一代快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,與上一代產(chǎn)品相比具有更高的逆轉(zhuǎn)錄效率。試劑盒中主要包含3管成分:gDNA Remover中主要包括濃縮的DNase及Buffer;4× EZscript RT Mix II中主要包含了逆轉(zhuǎn)錄所需的所有成分(逆轉(zhuǎn)錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs、Oligo dT18、Random Hexamer等)。 本試劑盒采用的DNase及Buffer反應(yīng)系統(tǒng)經(jīng)過特殊的優(yōu)化,僅需室溫(25°C)反應(yīng)5分鐘,就能降解95%以上的基因組DNA,極大的降低了可能殘留的基因組對結(jié)果的干擾。 本試劑盒采用的新型M-MLV突變體逆轉(zhuǎn)錄酶具有很強的抗干擾能力及擴增能力,擴增效率尤佳,同時采用了最新優(yōu)化的反應(yīng)體系,進一步提高了逆轉(zhuǎn)錄效率。使用本試劑盒逆轉(zhuǎn)錄15分鐘得到的擴增產(chǎn)物量可以達到AMV逆轉(zhuǎn)錄酶大約1h的產(chǎn)物量(Ct值相同)。后續(xù)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物建議用于PCR、qPCR,不建議用于基因克隆。 二、產(chǎn)品組分
*1:包括DNase和Buffer; *2:包括逆轉(zhuǎn)錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、Oligo(dT)18 Primer、Random Hexamer Primer等組分。 三、保存條件 本試劑盒建議置于-20℃保存。 四、試劑盒特點 1、本試劑盒為預先混好的4× EZscript RT Mix II,只需加入模板RNA和水混勻后便可以開始反應(yīng);使用了新一代逆轉(zhuǎn)錄酶,具有更強的酶活性和更高的靈敏度。 2、含有去除基因組DNA的gDNA Remover,只需室溫5分鐘即可去除基因組DNA。 3、只需42℃、15分鐘即可高效合成熒光定量PCR所需的高質(zhì)量cDNA模板。 4、反轉(zhuǎn)錄引物使用了Oligo(dT)18和Random Hexamer這兩種引物的混合物,極大提高了反轉(zhuǎn)錄的效率。 5、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可選擇多種儀器如水浴鍋、金屬浴,不局限于PCR儀。 五、注意事項 1、當同時需要進行數(shù)次反應(yīng)時,應(yīng)先配制各種試劑的混合液,然后再分裝到每個反應(yīng)管中。這樣可使所取的試劑體積更準確,減少試劑損失,避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或?qū)嶒炛g產(chǎn)生的誤差。 2、 gDNA Remover和4× EZscript RT Mix II在使用前需上下顛倒混勻,短暫離心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取時應(yīng)慢慢吸取。同時,要使用精確、量程適合的移液槍,并且不要使Tip插入液面過深,否則會因Tip壁粘著造成損失,而使酶量不足。 3、分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染。
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