產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品中包含反應緩沖液、BstLDNA聚合酶和耐熱型反轉錄酶的RT-EnzymesMix、凍干保護劑和熒光染料組分。其中反應緩沖液中含Mg2+,dNTP等擴增必須組分,使用時只需要將Buffer、反應酶、熒光染料、引物混合并加入模板即可;若添加凍干保護劑可進一步配置可凍干體系。
應用
適用于DNA、RNA等溫擴增。
運輸與保存方法
干冰運輸,-25~-15℃保存。
避免反復凍融,產(chǎn)品有效期12月。
實驗流程
1)將Buffer取出解凍,使用前充分渦旋混勻,并短暫離心收集液體至管底。
2)反應體系按下表配制
備注:10×PrimerMix濃度:16μMFIP/BIP,2μMF3/B3,4μMLoopF/B。核酸模板建議使用DEPC水溶解。
3)擴增反應
在熒光PCR儀(如ABI7500等)上設置如下程序。
注意事項
1)Buffer融化后可能會有白色沉淀,在室溫下充分混勻即可澄清。
2)反應溫度可根據(jù)引物情況在62℃-68℃間進行優(yōu)化。
3)實驗應規(guī)范操作,包括反應體系的配制、樣本處理及加樣等過程。為避免污染,建議在超凈臺中配制反應體系,在其他房間的通風櫥中加入模板以免產(chǎn)生假陽性干擾。
武漢瀚海新酶生物科技有限公司
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