中文名稱:柱式血液RNAout | 英文名稱:Column Blood RNAout |
保存條件: 常溫運輸和保存 | 純度規(guī)格: 99.99% |
產(chǎn)品類別: 分子生物學 RNA純化 |
柱式血液RNAout
產(chǎn)品及特點
本產(chǎn)品經(jīng)過基因精心優(yōu)化而得,多項指標超過國內(nèi)外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品是基因在血液 RNAOUT(CAT#:3071)基礎上開發(fā)的柱式升級產(chǎn)品,
專門從動物全血樣品中快速提取總 RNA。跟血液 RNAOUT 相比,本產(chǎn)品具有
下列特點:
1. 比血液 RNAout 更加簡單快捷,直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品,不需裂解紅細胞等任何預處理步驟,整個提取過程只需要十分鐘左右,可以全在室溫下進行。
2. 產(chǎn)量和純度更高,OD260/280 均在 2.0 左右,產(chǎn)率一般為 2-5 ug/mL人血。
3. 每次微量提取的大樣品處理量可以達到 1.5 mL,高于進口的同類產(chǎn)品。
4. 與常用的抗凝劑(包括肝素,EDTA,檸檬酸鈉,草酸鈉)兼容,得到的RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 Northern 雜交等研究。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝
柱式血液 RNAout 溶液 A LM71202a 50 mL 柱式血液 RNAout 溶液 B LM71202b 15 mL(棕色瓶) 柱式血液 RNAout 溶液 C LM71202c 50 mL 離心吸附柱 LM60911 50 套 通用洗柱液 LM60408 50 mL RNA 洗脫液 LM71207 10 mL 使用手冊 LM71202sc 1 份
運輸及保存 常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法
1. 將 0.2-1.5 mL 新鮮或解凍后的抗凝全血加入到 1.5 mL 塑料離心管中。
2. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘,棄上清(血漿)。如果此時血液細胞沉淀體積大于 0.2 mL, 則需要減少血液的使用量,具體減少量需根據(jù)具體情況決定,因為各個個體(尤其是患者)血液中白細胞數(shù)目差別很大。
3. 將 1 mL 溶液 A 加入到血液細胞沉淀中,用移液槍充分吹打沉淀使細胞裂解。
4. 將 0.3 mL 的溶液 B 加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
5. 和 0.2 mL 氯仿加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
6. 12000-15000 g 室溫離心 3-5 分鐘,將上清液(為無色或淺紅色,約0.5-0.9 mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。注意:轉(zhuǎn)移的液體不要超過 0.7mL,否則下一步不能加入等體積的溶液 C。為防止污染,好留 100 uL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色,中間層為白色,含有 DNA,蛋白質(zhì)和其他細胞破碎物,避免觸及或吸取。
7. 加入等體積的溶液 C,充分顛倒混勻。
8. 分兩次將溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后 12000-15000 g 室溫離心半分鐘,棄穿透液。
9. 加 0.7 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。
10. 如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。注意:增加此步可以進一步提高 RNA 的純度。
11. 室溫 12000-15000 g 離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的通用洗柱液會影響 RNA 的后續(xù)反應。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一個自備的 RNase-free 的收集管中,加入 50-100uL RNA 洗脫液,室溫放置 1-2 分鐘。
13. 12000-15000 g 室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為 RNA 樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的電泳檢測:如果需要做 Northern 雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳,因為非變性膠不能分離所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA 產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將 5-10 μL RNA 溶于 TE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在 OD260 的光吸收。通過光吸收可以得出 RNA 濃度(1OD260 的 RNA=40 μg/mL),進而計算出 RNA 的產(chǎn)量(濃度 X 體積)和產(chǎn)率(RNA 產(chǎn)量/組織用量)。人血 RNA 產(chǎn)率一般為 2-5 ug/mL。
16. RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響 RT-PCR 等反應。
成立日期 | 2016-08-08 (9年) | 注冊資本 | 100萬元整 |
員工人數(shù) | 1-10人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生物化工,有機原料,化學試劑,醫(yī)藥原料,技術服務 | 經(jīng)營模式 | 貿(mào)易,試劑,定制,服務 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥890 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2024-11-20 | |
¥2980.00 |
VIP9年
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北京索萊寶科技有限公司
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2024-11-20 | |
¥1490 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2024-11-20 | |
¥3380 |
VIP3年
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上海嘉定區(qū)澄瀏公路52號
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2024-11-20 |