一管式病毒DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是專(zhuān)門(mén)用于從血清(血漿)等液體樣品中提取病毒(如 HBV)DNA 的產(chǎn)品,其原理是異硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒,又能沉淀 DNA。本產(chǎn)品靈敏度高,穩(wěn)定性好,使用簡(jiǎn)單快捷,尤其適合于整合到臨床 PCR 檢測(cè)試劑盒中。
1. 回收率高,可以達(dá)到 90%以上,高于絕大部分基于離心柱的提取方法。
2. 靈敏度高,通過(guò) PCR 檢測(cè)到的最終靈敏度可以達(dá)到 30-50 拷貝/mL。
3. 一管式操作,不使用離心柱,整個(gè)操作過(guò)程均在室溫下完成。
4. 安全無(wú)毒,不需要使用苯酚和氯仿等有機(jī)溶液。
5. 處理量大,如果加上病毒離心富集步驟,最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。
6. 與 PCR 和熒光 PCR 兼容。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。
一管式病毒DNAout
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 塑料袋包裝
DNA 病毒裂解液 3674a 30 mL
使用手冊(cè) 3674sc 1 份
一管式病毒DNAout運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。自備試劑 異丙醇,70%乙醇
使用方法 1. 在 1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管(不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入 0.2 mL 液體樣品(血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等)。
1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品,則將拭子放入 0.2mL自備生理鹽水中擠壓出液體,然后取 0.2mL 進(jìn)行 DNA 提取。
1.2、 如果是糞便等半固定樣品,則取約 0.3mL 的樣品,加入 0,3 自備生理鹽水,震蕩重懸,離心取 0.2mL 上清進(jìn)行 DNA 提取。
1.3、 如果血液,細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體,可以離心用上清,也可以直接取用,但后者提取的 DNA 中有細(xì)胞的基因組 DNA。
1.4、 如果樣品是實(shí)體組織或培養(yǎng)細(xì)胞,則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心,用 0.2mL 上清液(含病毒)進(jìn)行 DNA 提取,但此種情況下最后得到的 DNA 不可避免的會(huì)含有基因組 DNA。
1.5、 如果液體樣品中的病毒需要富集,可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的0.2mL 繼續(xù)操作。
2. 在 0.2mL 樣品中加入 0.6mL DNA 病毒裂解液,振蕩 30 秒混勻后室溫放置10 分鐘。
3. 振蕩 30 秒混勻后加入 0.7 mL 自備的異丙醇,振蕩 30 秒混勻后,15,000 g室溫離心 15 分鐘。
4. 移棄上清,注意不要觸及管底的 DNA 沉淀,加入 1.0 mL 70%乙醇,振蕩數(shù)秒后 15,000 g 室溫離心 5 分鐘。
5. 移棄上清,注意不要觸及管底的 DNA 沉淀。再短暫離心數(shù)秒, 移棄殘留液體(殘留的乙醇會(huì)影響后續(xù)反應(yīng))。如果此時(shí)離心面的管壁上有可見(jiàn)的膜狀沉淀,屬于正?,F(xiàn)象(常見(jiàn)于血清血漿樣品)。加入 20uL 核酸樣品稀釋液,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀,使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?,F(xiàn)象。不要離心只取上清使用,因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻?DNA,必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
6. 樣品可以直接取適量用于 PCR,也可保存于-20℃長(zhǎng)期保存。
關(guān)鍵字: 一管式病毒DNAout廠(chǎng)家;一管式病毒DNAout現(xiàn)貨
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