產(chǎn)品簡(jiǎn)介 傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶,其中去污劑處理會(huì)使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。Phygene 細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡(jiǎn)單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各種下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、 使用方便,從細(xì)菌中提取蛋白不需經(jīng)過超聲破碎等前處理。 2、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至 30 分鐘-1 小時(shí)。 3、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 4、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 5、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 6、 本品可用于革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。
7、 本品不含 EDTA,可以用于金屬螯合層析等下游應(yīng)用。
注意事項(xiàng) 1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用。 2. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。 3. 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。 4. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。 5. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。 6. 使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。 7. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
常見問題 (一)蛋白濃度低? 膜蛋白濃度較低,需要盡可能加大細(xì)胞上樣量。處理部分組織樣本時(shí)可能沒有裂解完全,導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長(zhǎng)試劑 A 的處理時(shí)間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。 (二)用什么方法定量蛋白? 建議用 BCA 方法。不建議使用 Bradford 法,因?yàn)樵噭?A 中含有干擾 Bradford 法的組分,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用 Bradford 法定量。 (三)提取的蛋白具有活性嗎? 本試劑盒不含有離子型去垢劑組分,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。
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