規(guī)格 100mL | 500mL
存儲(chǔ) 陰涼避光保存;有效期一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DNS即二硝基水楊酸法是利用堿性條件下,二硝基水楊酸(DNS)與還原糖發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成3-氨基-5-硝基水楊酸,該產(chǎn)物在煮沸條件下顯棕紅色,且在一定濃度范圍內(nèi)顏色深淺與還原糖含量成比例關(guān)系的原理,用比色法測(cè)定還原糖含量的。因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團(tuán)的數(shù)量有關(guān),而對(duì)還原糖的種類沒(méi)有選擇性,故DNS方法適合用在多糖(如纖維素、半纖維素和淀粉等)水解產(chǎn)生的多種還原糖體系中。
操作步驟(僅供參考):
1、 還原糖的提取:
2、 總糖的水解和提取:
3、 制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線:取干凈離心管或試管,按下表進(jìn)行操作,以0號(hào)調(diào)零,檢測(cè)540nm處吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo),各標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4、還原糖測(cè)定:取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1ml,分別加入DNS試劑2ml,其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作,540nm處測(cè)定各管的吸光度。
計(jì)算:
還原糖的百分含量:
還原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100
總糖的百分含量:
總糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100×10×0.9
注意事項(xiàng):
1、 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
2、 待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
3、 如果樣品還原糖濃度過(guò)高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
4、 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用,×0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中,扣除水解時(shí)所消耗的水量。
3,5-Dinitrosalicylic acid (DNS or DNSA, IUPAC name 2-hydroxy-3,5-dinitrobenzoic acid) is an aromatic compound that reacts with reducing sugars and other reducing molecules to form 3-amino-5-nitrosalicylic acid, which strongly absorbs light at 540 nm. It was first introduced as a method to detect reducing substances in urine by James B. Sumner and has since been widely used, for example, for quantifying carbohydrate levels in blood. It is mainly used in assay of alpha-amylase. However, enzymatic methods are usually preferred due to DNS lack of specificity.
關(guān)鍵字: DNS試劑
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