名稱 Nuclear/Cytosol Fractionation Kit

規(guī)格 50T | 100T

存儲 提取液 2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。有效期一年。

試劑組分 

Component 50 assay 100 assay

Extract Reagent A（提取液 A） 20mL 40mL

Nuclear Store Buffer B（核保存液 B） 10mL 20mL

Protease Inhibitor Cocktail（蛋白酶抑制劑混合物） 100μL 200μL

REMARK:

1、蛋白酶抑制劑混合物避免反復凍融。

2、如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

產(chǎn)品簡介

細胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動物細胞中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。

本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel－shift 分析，報告分析，酶活性分析和 WB 等。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

1)移液器、吸頭

2)離心機及離心管

3)渦旋振蕩器

4)冰箱，冰盒

注意事項 

1. 本試劑盒僅供科學研究使用。

2. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

3. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

4. 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

5. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

6. 使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。

7. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用說明

1. 取 5-10×106 個細胞（細胞數(shù)量根據(jù)實驗情況調(diào)整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為細胞體積的 5-10倍即可，請根據(jù)實際情況調(diào)整），在 4℃，500×g 條件下離心 2-3 分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。

2. 用冷 PBS 洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清?！咀ⅰ吭?nbsp;4℃，500×g 條件下離心 5 分鐘。

3. 在細胞沉淀中加入 400μl 冷的提取液 A，渦旋振蕩混勻或吹打混勻，置冰上振蕩 30 分鐘。（沒有振蕩條件的話，也可冰上靜置，中間每隔 5 分鐘渦旋振蕩或吹打混勻。）

4. 在 4℃，1200×g 條件下離心 5 分鐘。

5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

6. 沉淀用 PBS 洗滌一次，然后在 4℃，2000×g 條件下離心 5 分鐘，棄上清。

7. 沉淀為細胞核組分，將沉淀用 200μL 保存液 B 重懸后保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>