??????EMSA突變探針-ARE是用于EMSA(也稱gel?shift)研究的ARE?consensus?oligonucleotide的突變體??梢宰鳛镋MSA探針-ARE的陰性對照,用于EMSA結(jié)合反應(yīng)中突變探針的冷競爭反應(yīng)等。 ??????EMSA突變探針-ARE的序列如下: ??????5'-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3' ??????3'-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5' ??????EMSA突變探針-ARE中ARE的公認的位點發(fā)生了突變,從而使相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子無法和該突變探針結(jié)合。在探針冷競爭反應(yīng)中,正常 的標記探針和ARE的結(jié)合的條帶會被抑制;而在突變探針冷競爭反應(yīng)(cold competition)中,正常的標記探針和相應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合的條帶不會被抑制。參考 下圖。 圖1. 一個典型的EMSA/Gel- Shift分析圖 ??????1,陰性對照反應(yīng)(標記探針);2,常規(guī)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標記探針);3,探針冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記探針);4,突變探針的冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記突變探針);5,Super-shift反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標記探針+目的轉(zhuǎn)錄因子的特異抗體)。 ??????一個包裝的突變探針,如果用于同位素標記EMSA探針的突變探針冷競爭反應(yīng),可以進行90-180個突變探針的冷競爭反應(yīng)。如果用 于生物素標記探針的冷競爭時,可以進行約30個冷競爭反應(yīng)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。 注意事項: ??????避免加熱到40℃以上,溫度過高會導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。 ??????對于EMSA的詳細操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說明。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。?
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