EMSA突變探針-AP2 (10μM)
EMSA突變探針-AP2是用于EMSA(也稱gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突變體??梢宰鳛镋MSA探針-AP2的陰性對照,用于EMSA結(jié)合反應(yīng)中突變探針的冷競爭反應(yīng)等。 EMSA突變探針-AP2的序列如下: 5'-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3' 3'-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5' EMSA突變探針-AP2中AP2的公認(rèn)的結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生了突變,從而使AP2無法和該突變探針結(jié)合。在探針冷競爭反應(yīng)中,正常的標(biāo)記探針和AP2的結(jié)合的條帶會(huì)被抑制;而在突變探針冷競爭反應(yīng)(cold competition)中,正常的標(biāo)記探針和AP2的結(jié)合的條帶不會(huì)被抑制。參考下圖。 圖1. 一個(gè)典型的EMSA/Gel- Shift分析圖 1,陰性對照反應(yīng)(標(biāo)記探針);2,常規(guī)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針);3,探針冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記探針);4,突變探針的冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記突變探針);5,Super-shift反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+目的轉(zhuǎn)錄因子的特異抗體)。 一個(gè)包裝的突變探針,如果用于同位素標(biāo)記EMSA探針的突變探針冷競爭反應(yīng),可以進(jìn)行90-180個(gè)突變探針的冷競爭反應(yīng)。如果用于生物素標(biāo)記探針的冷競爭時(shí),可以進(jìn)行約30個(gè)冷競爭反應(yīng)。 包裝清單:
保存條件: -20℃保存,一年有效。 注意事項(xiàng): 避免加熱到40℃以上,溫度過高會(huì)導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。 對于EMSA的詳細(xì)操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說明。 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明: 1. 用于突變探針的冷競爭反應(yīng),可以參考如下反應(yīng)體系: 突變探針的冷競爭反應(yīng):
Nuclease-Free Water
EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X)
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子
未標(biāo)記的突變探針
標(biāo)記好的探針
總體積
如果使用更大體積的未標(biāo)記的突變探針,Nuclease-Free Water的體積就要相應(yīng)減少,使總體積保持不變。
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