??????碧云天的Mouse IL-2 ELISA Kit (Mouse Interleukin-2 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠白細胞介素2酶聯免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的IL-2的ELISA試劑盒。
??????本產品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為7.7pg/ml，與小鼠C10、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1、IL-3、IL-5、IL-6、IL-9、IL-13、JE、KC、LIF、M-CSF、MIP-1、MIP-2、SCF、TNF、Tpo、VEGF，人IL-2、IL-2 sRα、IL-2 sRβ等沒有交叉反應，板內、板間變異系數均小于10%。
??????IL-2即白細胞介素-2(簡稱白介2)，也稱為T cell growth factor (TCGF)，是一種分子量約為15-18kDa的糖基化α螺旋多肽，屬于γc細胞因子家族，以單體形式存在，半衰期極短(<30min)。成熟的小鼠IL-2是由169個氨基酸剪掉20個氨基酸的信號肽后所剩余的149個氨基酸組成，成熟結構域自然狀態(tài)下呈α螺旋結構，翻譯后加工包括第三位Thr位點的O-糖基化和二硫鍵的形成。蛋白鏈中有三個半胱氨酸殘基(Cys)，位于第58、105和125位。58位和105位半胱氨酸殘基結合形成二硫鍵是蛋白具有活性的必備前提。成熟的小鼠IL-2與人和大鼠IL-2的氨基酸同源性分別達56%和73%。γδT細胞、活化的CD4⁺和CD8⁺ T細胞、神經細胞、小神經膠質細胞和造血干細胞等均能夠分泌IL-2。
??????IL-2受體(IL-2R)是異源三聚體，由55kDa的CD25/IL-2 Rα鏈、70kDa的IL-2 Rβ和65kDa的γ_c鏈組成。IL-2首先與IL-2 Rα結合形成二元復合物，然后募集IL-2 Rβ和γ_c形成四聚體的信號復合物。除了IL-2，IL-2 Rβ同時也是IL-15四聚體信號復合物的組成部分，而γ_c是IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21受體所共有的公共鏈。
??????IL-2在抗體刺激引起的不同反應階段的T細胞，自然殺傷細胞和B細胞的細胞增殖方面起重要的作用，此外，IL-2還可調節(jié)γ干擾素、主要組織相容性抗原的表達，刺激活化的B細胞的增殖和分化，提高自然殺傷細胞的活性和抑制粒細胞/巨噬細胞的增殖。IL-2還可誘導少膠突細胞的增殖和分化。
??????IL-2與其受體結合后通過磷酸化作用激活JAK-STAT信號通路，將信號傳遞至細胞核實現對目標基因的調控作用。此外，在Shc蛋白的作用下，IL-2還可以通過形成Grb2/SOS復合物實現對下游Ras/Raf/MEK/MAPK和PI3K/Akt/P70S6K等多種信號通路的激活。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中小鼠IL-2的濃度，其原理見圖1。小鼠IL-2特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的小鼠IL-2會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗小鼠IL-2抗體后，生物素化抗小鼠IL-2抗體與小鼠IL-2結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現定量檢測。小鼠IL-2濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中IL-2濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

??????一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

保存條件：
??????除標準品外，4℃保存6個月內有效。標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效。
注意事項：
??????由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
??????洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
??????為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
??????TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
??????加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
??????不宜混用不同批號的試劑盒組份，每批次試劑盒均經過獨立測試。
??????充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
??????本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
??????洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
??????檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
??????加樣過程中須避免氣泡的產生。
??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。