小鼠子宮頸上皮細(xì)胞提取物

子宮頸位于子宮下部，上端與子宮體相連，下端深入陰道。子宮頸突出于陰道內(nèi)，內(nèi)含有腺體，可分泌一種粘液，即宮頸粘液，這種粘液的性狀和量的多少，與子宮內(nèi)膜一樣，受卵巢功能的影響并呈明顯的周期性變化。

基因組DNA制備：采用酶解法裂解細(xì)胞，利用硅膠膜離心柱特異地吸附DNA，去除蛋白質(zhì)、鹽類、脂類等雜質(zhì)，有效地保持基因組DNA的完整性。提取的DNA適用于酶切、PCR、Southern Blot等實(shí)驗(yàn)。
    總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化?？道噬锾峁┑目俁NA樣品附有RNA樣品OD值、濃度、總含量等。
    cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及2μg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)控分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
    microRNA制備:采用具有超強(qiáng)的裂解能力和抽提靈敏度microRNA試劑盒制備，結(jié)合試劑盒采用的特殊吸附膜，大大增加了小分子RNA的吸附力，獲得的microRNA純度好，得率高，可以直接用于各種下游實(shí)驗(yàn)，如Northern Blot分析，Real-Time PCR，Microarray Analysis等。
    蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl,1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備細(xì)胞蛋白裂解液，離心去除細(xì)胞碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。
    細(xì)胞沉淀制備：首先分離培養(yǎng)出高質(zhì)量的原代細(xì)胞，然后經(jīng)平衡鹽溶液清洗去除細(xì)胞表面雜質(zhì)，最后用合適的裂解液裂解細(xì)胞并離心獲得細(xì)胞沉淀。