化學(xué)名

4-[(E)-2-(5,5,8,8-tetramethyl-6,7-dihydronaphthalen-2-yl)prop-1-enyl]benzoic acid

簡稱

TTNPB

別名

AGN 191183, AGN-191183, Arotinoid Ro-137410, Ro 13-7410, Arotinoid acid, AGN 191183

中文名

芳維甲酸

化學(xué)式

C₂₄H₂₈O₂

分子量

348.48

CAS號

71441-28-6

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO15mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.43ml DMSO，或者每3.48mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SD7230-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

TTNPB (Arotinoid Acid)是有效的RAR激動劑，抑制與[³H]tRA結(jié)合，作用于人類RARα、β和γ, IC50分別為5.1nM、4.5nM和9.3nM。

信號通路

Metabolism

靶點

RARβ

RARα

RARγ

RARγ

－

IC50

4.5nM

5.1nM

9.3nM

9.3nM

－

體外研究

TTNPB以高親和力結(jié)合到核視黃酸受體，抑制[³H]tRA與mRARα、β以及γ的結(jié)合，其IC50分別為3.8nM、4.0nM和4.5nM。在使用條件培養(yǎng)基72小時后，TTNPB增加JEG-3細胞中小鼠RARs的轉(zhuǎn)錄活性，對mRARα、β以及γ的EC50分別為2.0nM、1.1nM和0.8nM。TTNPB通過誘導(dǎo)G1細胞周期阻滯，抑制正常人體乳腺上皮細胞(HMECs)和雌激素受體-陽性(ER-陽性)乳腺癌細胞的生長。TTNPB引起ES-D3細胞分化的濃度依賴性減少。

體內(nèi)研究

TTNPB(0.25毫克/千克)通過誘導(dǎo)細胞凋亡引起MXT-HS和MXT-HI模型的生長抑制。

臨床實驗

N/A

特征

N/A

酶活性檢測實驗

方法

結(jié)合實驗如先前所述進行(Allenby et al., 1993, 1994)。簡言之，將標(biāo)記的和未標(biāo)記的類視黃酸添加到核葉或胞質(zhì)部分的乙醇中，使加入乙醇的總量在所有試管中保持不變，并且不超過培養(yǎng)基體積的2%。該受體制劑與類視黃醇在4℃下培養(yǎng)4-6小時。平衡態(tài)實現(xiàn)之后，交聯(lián)葡聚糖PD-10脫鹽柱被用于從游離的放射性配體中分離結(jié)合的放射性配體。對于競爭性結(jié)合測定法，不同濃度的未標(biāo)記的競爭性配體與適當(dāng)?shù)暮诵◇w或胞質(zhì)溶膠在固定濃度的[³H]tRA (sp. act. 49.3Ci/mmol)或者[³H]9-cis RA(sp. act. 24.0Ci/mmol)存在下被培育。[³H]tRA和[³H]9-cis RA在核受體結(jié)合實驗中的終濃度為5nM。[³H]tRA在CRABP結(jié)合實驗中的終濃度為30nM。計算出的IC50s如上所訴(DeLean et al., 1978)。對于飽和動力學(xué)，在100倍摩爾過量對應(yīng)的未標(biāo)記類視黃醇存在(非特異性結(jié)合)或不存在(完全結(jié)合)下，增加濃度的放射性配體([³H]tRA sp. act. 49.3Ci/mmol, [³H]TTNPB sp. act. 5.5Ci/mMol)被加入到適當(dāng)受體亞型的核葉中。特異性結(jié)合被定義為總結(jié)合減去非特異性結(jié)合。飽和動力學(xué)的計算如前所述(Scatchard, 1949; Grippo and Gudas, 1987; Levin et al., 1992)。

細胞實驗

細胞系

T47D細胞和184細胞

濃度

~1μM

處理時間

8-12天

方法

人類乳腺上皮細胞被維持在乳腺上皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MEBM)中，用乳腺上皮生長培養(yǎng)基(MEGM)試劑盒進行增補。184和184B5細胞被維持在MEBM不含鈉-碳酸氫鹽(MEBM-SBF)中，用MEGM試劑盒進行增補，異丙腎上腺素(10μM)，以及轉(zhuǎn)鐵蛋白(5微克/毫升)。MCF10A細胞系被維持在DME/F12中，其包含5%高溫滅活的馬血清，青霉素/鏈霉素(100微克/毫升以及100微克/毫升)，氫化可的松(1.4μM)，胰島素(10微克/毫升)，霍亂霉素(100納克/毫升)，以及表皮生長因子(20納克/毫升)。乳腺腫瘤細胞被維持在改進過的MEM鋅選擇性培養(yǎng)基中，其包含10%牛胎兒血清，1%谷氨酸鹽，以及1%青霉素/鏈霉素。對于生長實驗，細胞在培養(yǎng)基中用不同的類視黃酸處理特定天數(shù)，在T47D細胞中治療每隔一天發(fā)生變化，在184細胞中治療每兩天發(fā)生一次變化。細胞增殖由本方案中CellTiter96含水非放射性細胞增殖試驗測定。該比色試驗確定樣本中活細胞的數(shù)量。每個代表樣本的點以一式四份進行采樣。

動物實驗

動物模型

對激素敏感(HS)和不敏感(HI)品系的患有乳腺癌的MXT小鼠模型

配制

生理鹽水

劑量

~0.25毫克/千克

給藥方式

i.p.

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

SD7230-10mM

TTNPB (RAP激動劑)

10mM×0.2ml

SD7230-5mg

TTNPB (RAP激動劑)

5mg

SD7230-25mg

TTNPB (RAP激動劑)

25mg

—

說明書

1份