化學(xué)名

42-deoxy-42-(1H-tetrazol-1-yl)-(42S)-Rapamycin

簡(jiǎn)稱

Zotarolimus

別名

ABT-578, ABT 578, ABT578, Zatarolimus

中文名

咗他莫司

化學(xué)式

C₅₂H₇₉N₅O₁₂

分子量

966.21

CAS號(hào)

221877-54-9

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO100mg/ml; Ethanol100mg/ml

溶液配制

5mg加入0.52ml DMSO，或者每9.66mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2681-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

Zotarolimus (ABT-578)是rapamycin的類似物，可以抑制FKBP-12結(jié)合的IC50為2.8nM。

信號(hào)通路

PI3K/Akt/mTOR

靶點(diǎn)

FKBP-12

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IC50

2.8nM

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體外研究

Zotarolimus (ABT-578)是雷帕霉素的半合成類似物，由四唑環(huán)取代雷帕霉素42位上的天然羥基組制成。Zotarolimus能夠高效抑制平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，IC50值分別為2.9nM和2.6nM。Zotarolimus具有與雷帕霉素相似的結(jié)合免疫蛋白FKBP12的親和力，也具有相當(dāng)?shù)囊种迫撕痛笫骉細(xì)胞體外增殖的效力。Zotarolimus抑制Con A誘導(dǎo)的人T細(xì)胞和大鼠T細(xì)胞的增殖，IC50分別為7.0nM和1337nM。

體內(nèi)研究

在28天充分表征的冠狀動(dòng)脈再狹窄的豬模型中，Zotarolimus洗脫支架有效減少內(nèi)膜增生。與金屬裸支架相比，Zotarolimus似乎能夠有效防止新生內(nèi)膜增厚，使后期損失從1.03mm降低到0.62mm，并伴隨47%的TVF減少(15.4%Driver支架到8.1%Endeavor支架)。Zotarolimus能夠有效抑制佐劑DTH，EAE和心臟移植排斥反應(yīng)，ED50值分別為1.72、1.17和3.71毫克/千克/天。

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

Zotarolimus在體內(nèi)半衰期短，并且在大鼠體內(nèi)表現(xiàn)出比雷帕霉素弱的全身性免疫抑制作用。

酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

方法

96孔微量滴定板首先用FKBP-12 CMP-KDO合成酶融合蛋白以10微克/毫升，100微升/孔涂層2-3小時(shí)，隨后加入50微升/孔緩沖液A(2% BSA和0.2% Tween-20 D-PBS溶液)進(jìn)行30-60分鐘。然后將微量滴定板用緩沖液B(0.2% Tween 的D-PBS溶液，pH調(diào)節(jié)為7.4)清洗3次。50微升緩沖液A()，20μM FK506緩沖液A(背景)，或者各種濃度的zotarolimus(10pM-1μM)在緩沖液A中加入到各孔中，隨后加入50微升含A-79397(一個(gè)FK506類似物)堿性磷酸酶偶聯(lián)物緩沖液A。微量滴定板在室溫下培育2-2.5小時(shí)，隨后用緩沖液B清洗3次。將大約100微升pNPP(p-硝基苯基-磷酸鹽)的0.1M氨基甲基丙醇加入到每孔中，平板在室溫下大約培養(yǎng)90-120分鐘。405nM下的吸光度通過(guò)ELISA板讀取。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

人冠狀動(dòng)脈細(xì)胞

濃度

~1μM

處理時(shí)間

5天

方法

細(xì)胞增殖通過(guò)測(cè)量體外氚化胸腺嘧啶的整合測(cè)定。人冠狀動(dòng)脈細(xì)胞(hCa)接種在組織培養(yǎng)瓶中擴(kuò)增，并在完全培養(yǎng)基(5000 hCaSMC; 10000 hCaEC)中以所需濃度應(yīng)用于96孔板。2天后，用不完全培養(yǎng)基取代完全培養(yǎng)基使細(xì)胞同步，并誘導(dǎo)G0狀態(tài)。2天后，移除不完全培養(yǎng)基，用完全培養(yǎng)基(血清/生長(zhǎng)因子)取代以誘導(dǎo)G0到G1轉(zhuǎn)變。完全培養(yǎng)基中也包含所需濃度的藥物，以確定其對(duì)細(xì)胞增殖的影響。在第7天，將3H-胸苷加入到細(xì)胞中，并監(jiān)控DNA的合成，放射性整合過(guò)夜后收集細(xì)胞。培育72小時(shí)后，每孔加入25微升(1μCi/孔) 3H-胸苷。細(xì)胞在37℃下培育16-18小時(shí)，以允許3H-胸苷整合到新合成的DNA中，將細(xì)胞采集到含有粘合玻璃纖維過(guò)濾器的96孔板中。將濾板在空氣中干燥過(guò)夜，MicroScint-20 (25微升)加入到每個(gè)過(guò)濾器孔中并計(jì)數(shù)。藥物活性通過(guò)3H-胸苷整合到新合成的DNA中相對(duì)于細(xì)胞在完全培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)確定。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物模型

雄性Sprague-Dawley大鼠

配制

乙醇：丙二醇：聚氧乙烯蓖麻油：D5W載體(20：30：2：48，體積)

劑量

2.5毫克/千克

給藥方式

靜脈注射或口服

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

SF2681-10mM

Zotarolimus (mTOR抑制劑)

10mM×0.2ml

SF2681-5mg

Zotarolimus (mTOR抑制劑)

5mg

SF2681-25mg

Zotarolimus (mTOR抑制劑)

25mg

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說(shuō)明書

1份