??????碧云天生產(chǎn)的中性紅染色液(Neutral Red Staining Solution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成紅色的染色液。本染色液呈酸性,適合用于固定的組織或細(xì)胞的染色,不適合用于組織或細(xì)胞的活體染色。如需用于活細(xì)胞染色,推薦選購(gòu)碧云天的中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)(C0125)。 ??????本染色液常用于組織或細(xì)胞染色中細(xì)胞核的紅色復(fù)染(counterstain)。 ??????細(xì)胞對(duì)中性紅的攝入取決于細(xì)胞對(duì)pH梯度的維持能力,而這種能力是通過(guò)產(chǎn)生ATP來(lái)維持的。在生理pH條件下,中性紅染料的凈電荷幾乎為零,從而使其能通過(guò)非離子被動(dòng)擴(kuò)散的方式穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。溶酶體(lysosomes)中的質(zhì)子梯度使溶酶體中的pH值低于細(xì)胞質(zhì),從而可以使中性紅帶上電荷并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時(shí),細(xì)胞數(shù)量增多,可以攝入的中性紅的量就會(huì)增加。在細(xì)胞受到損傷時(shí),中性紅的攝入能力會(huì)下降。經(jīng)過(guò)一定時(shí)間攝入后,細(xì)胞經(jīng)清洗并用裂解液裂解即可釋放中性紅而用于檢測(cè)。這樣通過(guò)測(cè)定細(xì)胞對(duì)于中性紅的攝入量,就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性情況。 ???????中性紅同時(shí)也是一種pH指示劑,在酸性時(shí)呈紅色,在pH6.8升至pH8.0時(shí)由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。對(duì)于活細(xì)胞,中性紅積累在溶酶體中,而溶酶體中是酸性環(huán)境,因此溶酶體被中性紅染成紅色。對(duì)于固定后的細(xì)胞,溶酶體中的酸性環(huán)境被破壞,此時(shí)溶酶體不會(huì)被染色,而細(xì)胞中呈酸性的DNA和RNA可以被中性紅染色,通常細(xì)胞核中的大量基因組DNA等核酸被濃染而導(dǎo)致細(xì)胞核呈現(xiàn)較深的紅色,而細(xì)胞漿中的DNA和RNA等酸性物質(zhì)被染色成較淺的紅色。本產(chǎn)品對(duì)經(jīng)過(guò)固定處理的HeLa和L929細(xì)胞的染色效果參考圖1。
圖1. HeLa和L929細(xì)胞固定后,加入中性紅染色液后的染色效果。左圖HeLa細(xì)胞,右圖L929細(xì)胞。
??????中性紅的分子式為C15H17IN4,分子量為288.8,CAS Number為553-24-2。 ??????一個(gè)包裝的本染色液如果用于切片或涂片的染色,至少可以染色500個(gè)樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃避光保存,一年有效。-20℃避光保存可以存放更長(zhǎng)時(shí)間。 注意事項(xiàng): ??????需自備4%多聚甲醛。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備70%和90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。 ??????樣品數(shù)量較多時(shí),可以使用碧云天生產(chǎn)的染色架和染色缸,便于操作。 ??????次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。 ??????中性紅染色液長(zhǎng)期存放會(huì)產(chǎn)生沉淀??梢灾苯游∪旧旱纳锨逡菏褂?,也可以使用針頭濾器等過(guò)濾去除沉淀后繼續(xù)使用,不會(huì)影響使用效果。因?yàn)槿旧褐械闹行约t本來(lái)就是過(guò)量的。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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