??????碧云天生產(chǎn)的中性紅染色液(Neutral Red Staining Solution)是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成紅色的染色液。本染色液呈酸性,適合用于固定的組織或細胞的染色,不適合用于組織或細胞的活體染色。如需用于活細胞染色,推薦選購碧云天的中性紅染色液(活細胞染色用)(C0125)。 ??????本染色液常用于組織或細胞染色中細胞核的紅色復(fù)染(counterstain)。 ??????細胞對中性紅的攝入取決于細胞對pH梯度的維持能力,而這種能力是通過產(chǎn)生ATP來維持的。在生理pH條件下,中性紅染料的凈電荷幾乎為零,從而使其能通過非離子被動擴散的方式穿透細胞膜進入細胞。溶酶體(lysosomes)中的質(zhì)子梯度使溶酶體中的pH值低于細胞質(zhì),從而可以使中性紅帶上電荷并在溶酶體中積累。在細胞增殖加快時,細胞數(shù)量增多,可以攝入的中性紅的量就會增加。在細胞受到損傷時,中性紅的攝入能力會下降。經(jīng)過一定時間攝入后,細胞經(jīng)清洗并用裂解液裂解即可釋放中性紅而用于檢測。這樣通過測定細胞對于中性紅的攝入量,就可以確定細胞的增殖或毒性情況。 ???????中性紅同時也是一種pH指示劑,在酸性時呈紅色,在pH6.8升至pH8.0時由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。對于活細胞,中性紅積累在溶酶體中,而溶酶體中是酸性環(huán)境,因此溶酶體被中性紅染成紅色。對于固定后的細胞,溶酶體中的酸性環(huán)境被破壞,此時溶酶體不會被染色,而細胞中呈酸性的DNA和RNA可以被中性紅染色,通常細胞核中的大量基因組DNA等核酸被濃染而導(dǎo)致細胞核呈現(xiàn)較深的紅色,而細胞漿中的DNA和RNA等酸性物質(zhì)被染色成較淺的紅色。本產(chǎn)品對經(jīng)過固定處理的HeLa和L929細胞的染色效果參考圖1。
圖1. HeLa和L929細胞固定后,加入中性紅染色液后的染色效果。左圖HeLa細胞,右圖L929細胞。
??????中性紅的分子式為C15H17IN4,分子量為288.8,CAS Number為553-24-2。 ??????一個包裝的本染色液如果用于切片或涂片的染色,至少可以染色500個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃避光保存,一年有效。-20℃避光保存可以存放更長時間。 注意事項: ??????需自備4%多聚甲醛。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備70%和90%乙醇,無水乙醇以及二甲苯。 ??????樣品數(shù)量較多時,可以使用碧云天生產(chǎn)的染色架和染色缸,便于操作。 ??????次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。 ??????中性紅染色液長期存放會產(chǎn)生沉淀??梢灾苯游∪旧旱纳锨逡菏褂茫部梢允褂冕橆^濾器等過濾去除沉淀后繼續(xù)使用,不會影響使用效果。因為染色液中的中性紅本來就是過量的。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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