??????碧云天生產(chǎn)的中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)(Neutral Red Staining Solution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成紅色的染色液。本染色液配制在pH值較接近中性的,并且和普通的細(xì)胞培養(yǎng)液等滲的溶液中,可以用于外周血細(xì)胞的活體染色,也可以用于其它活體細(xì)胞或組織的染色。 ??????本染色液經(jīng)過(guò)濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的染色。 ??????細(xì)胞對(duì)中性紅的攝入取決于細(xì)胞對(duì)pH梯度的維持能力,而這種能力是通過(guò)產(chǎn)生ATP來(lái)維持的。在生理pH條件下,中性紅染料的凈電荷幾乎為零,從而使其能通過(guò)非離子被動(dòng)擴(kuò)散的方式穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。溶酶體(lysosomes)中的質(zhì)子梯度使溶酶體中的pH值低于細(xì)胞質(zhì),從而可以使中性紅帶上電荷并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時(shí),細(xì)胞數(shù)量增多,可以攝入的中性紅的量就會(huì)增加。在細(xì)胞受到損傷時(shí),中性紅的攝入能力會(huì)下降。經(jīng)過(guò)一定時(shí)間攝入后,細(xì)胞經(jīng)清洗并用裂解液裂解即可釋放中性紅而用于檢測(cè)。這樣通過(guò)測(cè)定細(xì)胞對(duì)于中性紅的攝入量,就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性情況。 ??????中性紅同時(shí)也是一種pH指示劑,在酸性時(shí)呈紅色,在pH6.8升至pH8.0時(shí)由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。對(duì)于活細(xì)胞,中性紅積累在溶酶體中,而溶酶體中是酸性環(huán)境,因此溶酶體被中性紅染成紅色。本產(chǎn)品中的中性紅染色液對(duì)正常培養(yǎng)的HeLa和L929細(xì)胞的染色效果參考圖1。
圖1. 正常培養(yǎng)的HeLa和L929細(xì)胞加入中性紅染色液后的染色效果。左圖HeLa細(xì)胞,右圖L929細(xì)胞。
??????中性紅的分子式為C15H17IN4,分子量為288.8,CAS Number為553-24-2。 ??????如果每樣需使用0.5ml本染色液,一個(gè)包裝的本染色液可檢測(cè)200個(gè)樣品。如用于涂片的染色,至少可染色500個(gè)樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃避光保存,一年有效。-20℃避光保存可以存放更長(zhǎng)時(shí)間。 注意事項(xiàng): ??????次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定染色時(shí)間。 ? ? ?本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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