鞣花酸是一種新型,是一種植物多酚類化合物,廣泛存在于自然界各種軟果、堅(jiān)果等植物果實(shí)中,對化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)癌變及其他多種癌變有明顯的抑制作用。
測定鞣花酸的方法很多,有反滴定法、分光光度法、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。
現(xiàn)建立了HPLC法測定鞣花酸的含量,該法準(zhǔn)確,分離效果好,回收率高。
方法如下:Agilent 1200HPLC液相色譜儀;十萬分之一電子天平;鞣花酸對照品含量 >95%;甲醇、乙腈(色譜純,默克公司生產(chǎn));水為超純水。
色譜條件: 色譜柱:BDS C18柱(150mm×46mm,5μm);
流動相:1.2%磷酸溶液:乙腈=85:15;檢測波長:254nm;流速1.0ml/min;柱溫:室溫;進(jìn)樣量:20μL。
在此條件下,鞣花酸主峰的出峰時(shí)間小于10min。
系統(tǒng)適用性試驗(yàn): 在上述液相色譜條件下,所得液相色譜圖中,主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度大于1.5,符合要求。
對照品溶液的制備: 精確稱取鞣花酸對照品10mg,用約80ml色譜甲醇轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,超聲5min,冷卻至室溫,甲醇定容至100ml刻度,搖勻。
供試品溶液制備: 精密稱取鞣花酸樣品10mg,置于10ml小燒杯中,用約80ml色譜甲醇轉(zhuǎn)移至容量瓶中,超聲5min,冷卻至室溫,甲醇定容至100ml,搖勻,作為供試品溶液。