中文名稱 | 異丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 |
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中文別名 | 異丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 |
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英文名稱 | IPTG |
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英文別名 | Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside;SZLIGgalactopyranoside |
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CAS No. | 367-93-1 |
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分子式 | C9H18O5S |
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分子量 | 123.00 |
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密度 | 1.3329 (rough estimate) |
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沸點(diǎn) | 438.4°C at 760 mmHg |
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水溶性 | 溶解 |
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存儲(chǔ)條件 | 2-8℃ |
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用途 | 基因工程、誘導(dǎo)蛋白質(zhì)表達(dá) |
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1.分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域:
誘導(dǎo)基因表達(dá):IPTG 可以特異性地與阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白構(gòu)象發(fā)生變化,從而從操縱基因上解離,解除對(duì)啟動(dòng)子的抑制,啟動(dòng)下游目的基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的表達(dá)。例如在大腸桿菌中表達(dá)外源基因時(shí),將目標(biāo)基因置于 lac 啟動(dòng)子的控制之下,通過(guò)添加 IPTG 來(lái)誘導(dǎo)目標(biāo)基因的表達(dá)。
藍(lán)白斑篩選:IPTG 常與 X-gal 等試劑結(jié)合使用,用于重組細(xì)菌菌落的藍(lán)白篩選。在含有 IPTG 和 X-gal 的培養(yǎng)基上,能夠誘導(dǎo)表達(dá) β- 半乳糖苷酶的菌落會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色,而不能表達(dá)的菌落則呈現(xiàn)白色,有助于快速識(shí)別含有目標(biāo)基因的重組菌落。
2.蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域
蛋白質(zhì)表達(dá)與純化:IPTG 可誘導(dǎo)細(xì)胞大量產(chǎn)生目標(biāo)蛋白質(zhì),從而使研究人員更容易分離和純化這些蛋白質(zhì)。在融合蛋白表達(dá)系統(tǒng)中,IPTG 可以誘導(dǎo)融合蛋白的表達(dá),然后通過(guò)親和層析等方法進(jìn)行純化。
研究蛋白質(zhì)功能和相互作用:通過(guò) IPTG 誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白質(zhì)可以用于研究蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的作用、與其他分子的相互作用以及在疾病中的角色等。還可以在兩個(gè)蛋白質(zhì)之間克隆 lacZ,使兩蛋白的相互作用可導(dǎo)致 lacZ 表達(dá),將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌,在不同條件下用 IPTG 誘導(dǎo)并經(jīng) Blue-Gal 染色,通過(guò)觀察藍(lán)斑的形成與消失,判斷兩蛋白的相互作用與結(jié)合情況。
3.藥物研發(fā)領(lǐng)域
藥物篩選:IPTG 可以用于篩選能夠抑制 β- 半乳糖苷酶活性的藥物,從而發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點(diǎn)。
研究基因表達(dá)和調(diào)控機(jī)制:在研究與治療相關(guān)基因的表達(dá)和調(diào)控機(jī)制方面發(fā)揮作用,幫助科研人員了解疾病相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控規(guī)律,為開發(fā)新的治療方法和藥物提供理論基礎(chǔ)。
關(guān)鍵字: 誘導(dǎo)劑;IPTG;大腸桿菌;硫代半乳糖;
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