布雷非德菌素A Brefeldin A（蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑）
關(guān)鍵詞：淋巴細(xì)胞活化（Lymphocyte Activation），胞內(nèi)細(xì)胞因子表達(dá)，流式分析FACS，PKC激活劑PMA，鈣離子載體，蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)阻斷劑，CAS：20350-15-6
細(xì)胞因子（Cytokines）表達(dá)水平高低直接反映細(xì)胞在特異性刺激劑（物）下的應(yīng)答活動(dòng)，免疫學(xué)研究通常使用適當(dāng)?shù)拇碳﹣砑せ罴?xì)胞應(yīng)答，并通過某些藥物如莫能霉素（monensin）或布雷非德菌素A（Brefeldin A，BFA）作用以阻斷胞內(nèi)高爾基體介導(dǎo)的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)，促使細(xì)胞因子累積，提高細(xì)胞因子的胞內(nèi)信號(hào)，從而能借助流式分選技術(shù)（FACS）檢測細(xì)胞因子的表達(dá)水平。細(xì)胞因子表達(dá)具有自身的特征性。
常見的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑：
- Monensin莫能霉素，CAS：22373-78-0
簡單描述：天然離子載體(ionophore)，選擇性結(jié)合單價(jià)陽離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并將這些陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜內(nèi)?？善茐母郀柣w，抑制細(xì)胞內(nèi)的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)，常用作蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑，用于抑制細(xì)胞因子等分泌型蛋白的分泌，使其保留在細(xì)胞內(nèi)。
- Brefeldin A（BFA，布雷非德菌素A），CAS：20350-15-6
簡單描述：一種常用的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑，特異性地可逆地阻斷蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）轉(zhuǎn)運(yùn)到高爾基體（Golgi）。經(jīng)BFA處理，高爾基體很快被破壞并融合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，該過程呈現(xiàn)能量、溫度和微管依賴性。BFA是一種真菌代謝物，最初曾用作抗病毒試劑，現(xiàn)主要用于研究蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)。BFA也常被用于抑制細(xì)胞因子等蛋白的分泌，并用于增強(qiáng)分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)（sphingomyelin cycle），還可誘導(dǎo)一些腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。
一些應(yīng)用實(shí)例：
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml)
Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days
PMA (20 ng/ml)
plus
ionomycin (1μg/ml)
Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml)
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml)
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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關(guān)鍵字： 淋巴細(xì)胞活化（Lymphocyte Activation），胞內(nèi)細(xì)胞因子表達(dá)，流式分析FACS，PKC激活劑PMA，鈣離子載體，蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)阻斷劑，CAS：20350-15-6錨點(diǎn)
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