確定細胞轉染效率的高低非常重要，通過特異的核酸轉染指示劑轉染進入細胞核并結合兩種染料，可以精確定量地分析轉染效率及細胞毒性。
riboMONITOR?轉染指示劑試劑盒包含3種染料：riboTRACER? Green、NUCLEOstain?和DEADstain?，分別是用于檢測成功轉染細胞、全部細胞和死亡細胞。其中riboTRACER? Green能夠在轉染后富集于細胞核，不依賴于siRNA或miRNA序列，可方便、快速、準確地定量分析細胞轉染效率，以便對siRNA或miRNA轉染條件做進一步優(yōu)化。
產(chǎn)品優(yōu)勢
1、使用方便：僅需3步，熒光顯微鏡觀察即可
2、準確定量：富集于細胞核，精確定量轉染效率
3、毒性分析：可同時分析細胞毒性，優(yōu)化轉染試劑用量
哪種轉染試劑適合您？
銳博生物提供從siRNA/miRNA、mRNA/長鏈RNA到蛋白質的全系列轉染試劑，請根據(jù)下表確定適合您的轉染試劑。
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siRNA/miRNA/質粒轉染試劑 基因抑制效率高
| mRNA/長鏈RNA轉染試劑 適用于原代細胞 | 蛋白質轉染試劑 可實現(xiàn)高效轉染 |
| riboFECT? CP轉染試劑 | riboFECT? mRNA轉染試劑 | riboFECT? Protein轉染試劑
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| 試劑規(guī)格 | 0.5ml, 1ml | 0.5ml, 2.5ml | 0.5ml, 2.5ml |
| 樣品類型 | siRNA, miRNA | mRNA, 長鏈RNA | 蛋白質 |
| 轉染效率 | 很好 | 很好 | 高達98% |
| 細胞活力 | 很好 | 很好 | 好 |
| 細胞毒性 | 超低 | 超低 | 幾乎無細胞毒性 |
轉染細胞系 （部分） | HeLa，A549，HEK293T，HCT-116， NIH/3T3，HepG2，HNE1， L6，5637，H-bc，HSC，C2C12， Sertoli，CNE-2，5-8F， HAEC，DRG，CF，THP-1，MEL， PBMC，NSC，MSC，U2OS | human fibroblasts， CHO-K1， B16-F10，HEK293 |
HEK293，B16-F10，COS-7， COLO 205，dendritic cells (DC)， H9c2，human fibroblasts (primary cells)， HUVEC (primary cells)， Jurkat，MC3T3-E1，MEF (primary cells)， microglia， mouse podocytes (primary cells)， NIH/3T3，SK-OV-3，U-373 MG
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技術支持
評價實驗細胞系轉染的難易度
不同細胞系的轉染效率差異很大，如何鑒定目的細胞系是否適合轉染是細胞轉染實驗的基本問題。通常用熒光標記的siRNA或miRNA進行相應的轉染對照試驗，但該類轉染對照不均勻地分布于細胞各處，有時甚至會粘連成團，很難定量分析細胞的轉染效率。riboTRACER?是細胞核富集的核酸指示劑，通過與細胞核染料結合，即可精確定量分析細胞轉染效率和細胞毒性
圖1 使用riboMONITOR?檢測riboFECT? CP轉染siRNA于不同細胞系的轉染效率
Cells transfected with riboTRACER? Green (100nM) with riboFECT? CP (5 μl/well),
fixed with PFA, stain with NUCLEOstain? and DEADstain?, 20X of microscope.
評價轉染試劑的轉染效果與細胞毒性
不同的轉染試劑的轉染效果差別很大，不恰當?shù)剡x擇轉染試劑使轉染效率低下，甚至導致細胞的大量死亡。riboMONITOR?通過熒光定量檢測成功轉染的細胞、死亡細胞、全部細胞，實現(xiàn)了細胞轉染效率和細胞毒性的同時評估。
圖2 使用riboMONITOR? 轉染指示劑檢測3種轉染試劑轉染293T細胞的轉染效果
Reagent L的轉染試劑細胞毒性較大，易引起細胞大量死亡，Reagent X轉染試劑的轉染效率不高。
而riboFECT? CP的轉染效率較高，幾乎無細胞毒性，能夠順利轉染293T細胞。
優(yōu)化轉染條件，監(jiān)測轉染效果
轉染試劑用量和細胞密度是轉染實驗成功的關鍵，確保轉染效果的批次間的穩(wěn)定性，是實驗可重復性的重要保證。riboMONITOR? 通過結合細胞核染料，可快速檢測出細胞的轉染效率，優(yōu)化最佳的轉染試劑用量及細胞密度，確定最適宜的轉染條件，以實現(xiàn)細胞的高效轉染，減少實驗中不必要的實驗摸索。
A-B：采用0.4μl和1μl的Reagent L轉染Hela細胞的轉染效果及細胞毒性檢測；
C-D：采用0.4μl和1μl的Reagent L分別進行4萬和5萬細胞的轉染實驗，結果表明采用1μl Reagent L，
4萬細胞進行轉染時轉染效率最高（C），細胞毒性最?。―）
關鍵字： 細胞轉染;轉染指示劑;
廣州市銳博生物科技有限公司（簡稱銳博生物）成立于2004年，是一家由諾貝爾獎獲得者和國家重大人才工程入選者領銜的、以核酸技術為核心的國家火炬計劃重點高新技術企業(yè)?；谑澜珙I先的寡核苷酸和mRNA技術，銳博生物致力于提供高品質的各類寡核苷酸和mRNA產(chǎn)品（包括但不限于ASO、siRNA、CpG、Aptamer、crRNA、和tracrRNA）。此外，公司建立了符合或超過國際標準的寡核苷酸CDMO/CMO服務平臺、mRNA/LNP制劑開發(fā)和制造平臺，能夠為核酸藥物開發(fā)的各個階段提供一站式寡核苷酸/mRNA CDMO服務、以及LNP制劑開發(fā)和制造服務，為國內(nèi)外超過5000家機構提供產(chǎn)品或服務，現(xiàn)已躋身于全球核酸藥CDMO的知名企業(yè)行列。銳博生物擁有60多項自主知識產(chǎn)權核酸技術發(fā)明，獲得了廣東省核酸藥物工程實驗室、廣東省核酸醫(yī)藥工程技術研究中心、NMPA頒發(fā)的寡核酸藥品生產(chǎn)許可等資質，是中國核酸行業(yè)的領軍企業(yè)之一。