?？?B4 和四胺堿對奧沙利鉑耐藥人結(jié)腸癌細胞的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及其機制

中草藥成分在 PCV2 誘導的內(nèi)皮細胞分泌細胞因子中的作用。

雖然 T 淋巴細胞是負責宿主對病毒反應(yīng)（包括誘導炎癥反應(yīng)以幫助最終清除病毒）的主要細胞類型，但其他細胞，包括巨噬細胞、上皮細胞和樹突狀細胞也起著關(guān)鍵作用。內(nèi)皮細胞在病毒感染期間的生理/病理過程（如炎癥）中也起著重要作用。由于內(nèi)皮細胞可以被激活以釋放各種內(nèi)源性化合物，包括一些細胞因子，因此細胞細胞因子形成的離體測量可用于間接評估任何潛在的原位內(nèi)皮功能障礙。 這里介紹的研究旨在研究五種皂苷對內(nèi)皮細胞的潛在免疫調(diào)節(jié)作用：柴胡皂苷 A （SSA） 和 D （SSD）、三七皂苷 （PNS） 和三七皂苷 R1 （SR1） 和?？?B4 （AB4）。
方法和結(jié)果：
為此，用病毒分離物 PCV2-AH 攻擊細胞 （豬髂動脈內(nèi)皮系） 24 小時，然后用測試皂苷 （1、5 或 10 μg/ml） 在 37 °C 下再處理 24 小時。 然后收集培養(yǎng)上清液，并通過 ELISA 分析白細胞介素 （IL） -2 、 -4 和 -10 以及干擾素 （IFN） -γ。結(jié)果顯示 PNS 和 SR1 抑制 IL-4 的產(chǎn)生;PNS 、 SR1 和 AB4 抑制 IL-10 的分泌;SSA、SSD 和 PNS 上調(diào) IL-2 表達;SSA 和 SSD 提高了 IFNγ 水平。所有這些變化都很重要。
結(jié)論：
綜上所述，數(shù)據(jù)表明這些皂苷可能具有通過改變受感染的內(nèi)皮細胞產(chǎn)生這些選定細胞因子來調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫反應(yīng)的能力。然而，這些藥物對參與抗病毒反應(yīng)的其他關(guān)鍵細胞類型（包括 T 淋巴細胞）的影響仍有待確定。

奧沙利鉑 （L-OHP） 是結(jié)直腸癌最常用的化療藥物之一，L-OHP 耐藥在結(jié)直腸癌治療中非常常見。本研究旨在探討銀風苷 B4 （AB4） 和四丁堿 （Tet） 對 L-OHP 耐藥人結(jié)腸癌細胞系 LoVo/L-OHP 的逆轉(zhuǎn)作用，并闡明它們的分子機制。
方法和結(jié)果：
用不同濃度的 AB4 和 Tet 處理 LoVo/L-OHP 細胞 48 h，獲得無毒劑量。通過 MTT 測量藥物敏感性。處理后，檢測細胞周期和細胞凋亡情況。RT-PCR 檢測 P-gp mRNA 、 zDHHC9 mRNA 和 SMAD4 mRNA 的表達。Western blot 檢測 P-gp 、 zDHHC9 和 SMAD4 蛋白的表達。LoVo/L-OHP 對 L-OHP 的 IC50 為 （112.5±23.6） μg/mL，0.71 μg/mL AB4 和 0.45 μg/mL Tet（無毒劑量）處理后，IC50 降至 （62.8±21.4） μg/mL（P<0.05）和 （58.9±26.3） μg/mL（P<0.05）。細胞周期實驗顯示，G1 期細胞減少，S 期細胞增加，但差異無統(tǒng)計學意義 （P>0.05）。細胞凋亡實驗顯示，AB4 和 Tet 無毒劑量處理后凋亡率增加，但無統(tǒng)計學意義 （P>0.05）。RT-PCR 實驗顯示，與 LoVo 細胞相比，LoVo/L-OHP 細胞中 P-gp mRNA 和 zDHHC9 mRNA 的表達增加，SMAD4 mRNA 降低 （P<0.05），而發(fā)現(xiàn)無毒劑量 AB4 處理后 LoVo/L-OHP 細胞中的 P-gp mRNA 降低 （P<0.05）。Western blot 實驗顯示，AB4 處理后 LoVo/L-OHP 細胞中 P-gp 蛋白降低 （P<0.05），這與 PCR 結(jié)果一致。Tet 處理后，LoVo/L-OHP 細胞中 zDHHC9 蛋白在 LoVo/L-OHP 細胞中的表達降低 （P<0.05）。
結(jié)論：
AB4 和 Tet 對 LoVo/L-OHP 細胞對 L-OHP 的耐藥有一定的逆轉(zhuǎn)作用。抵抗反向效應(yīng)的分子機制與 AB4 P-gp 的下調(diào)和 Tet 的 zDHHC9 下調(diào)有關(guān)。