產(chǎn)品名稱： 大青葉PCR鑒定試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次/盒
本品產(chǎn)僅供科研
如需詳細(xì)的完整說(shuō)明書(shū)，可聯(lián)系客服免費(fèi)索取。
本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開(kāi)發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn)，不能用于定量。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
【試劑組成】
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
熒光 PCR 專用模板稀釋液 | 1mL×1 管 |
超純水 | 1mL×1 管 |
染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
qPCR 陽(yáng)性對(duì)照(1×10E7 拷貝/μL) | 50μL ×1 管 |
說(shuō)明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。
大青葉PCR鑒定試劑盒樣品的制備
1. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取反應(yīng)，多出的兩個(gè)中一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?nbsp;10μL 牛乳頭瘤病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E6 拷貝/μL，本試劑盒提供）再加上一定量的水作為制備的陽(yáng)性對(duì)照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）?？梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫?duì)照。
2. 用自選方法純化上述 N+2 個(gè)樣品的 DNA。本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)細(xì)菌DNA提取試劑盒兼容。
電泳分析
1. 取 5-10uL 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)瓊脂糖電泳，檢測(cè)擴(kuò)增效果，由于擴(kuò)增產(chǎn)物較短，建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。
2. 陽(yáng)性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為 200bp 左右。如果兩個(gè)陰性對(duì)照（樣品制備陰性對(duì)照或 PCR 陰性對(duì)照）有此擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明環(huán)境污染，則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無(wú)效，不需要分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 如果所有樣品和 PCR 陽(yáng)性對(duì)照均無(wú)此擴(kuò)增產(chǎn)物，則說(shuō)明有系統(tǒng)性的問(wèn)題（試劑、設(shè)備、程序、操作等），需要重復(fù)并排查原因。
4. 如果沒(méi)有上述兩種情況，則實(shí)驗(yàn)有效，可以分析樣品的擴(kuò)增結(jié)果。N+2 個(gè)樣品中有擴(kuò)增產(chǎn)物的判定為陽(yáng)性，無(wú)則判定為陰性。
大青葉PCR鑒定試劑盒樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
4、自備試劑：樣品DNA。
大青葉PCR鑒定試劑盒注意事項(xiàng)
1 所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；
2試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；
3 反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
4反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
6 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；
7 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；
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