霍亂毒素由(Cholera toxin,CT)兩個(gè)亞單位組成,即A亞單位(CTA)和B亞單位(CTB)。A亞單位是霍亂毒素的活性部分,B亞單位的主要功能是通過與哺乳動(dòng)物小腸上皮細(xì)胞上的單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂GM1結(jié)合而使得A亞單位進(jìn)入細(xì)胞?;魜y毒素由霍亂操縱子(ctx)編碼,從5到3方向,依次是反激活因子ToxR的識(shí)別序列、啟動(dòng)子、A基因(ctxA)、B基因(ctxB)和不依賴于r因子的轉(zhuǎn)錄終止系列?,F(xiàn)在普遍認(rèn)為操縱子中只有一個(gè)啟動(dòng)子,ctxA和ctxB位于同一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位中。在霍亂弧菌中,ctxB基因的表達(dá)水平是ctxA 基因的5倍,克隆的ctx操縱子在大腸桿菌中表達(dá)時(shí),B基因的表達(dá)水平是A基因的6倍以上。但曹誠等研究發(fā)現(xiàn),霍亂毒素B亞單位基因上游Xbal~Clal限制性片段內(nèi)(即在霍亂毒素A亞基結(jié)構(gòu)基因內(nèi)部)存在具有啟動(dòng)子活性的序列。在該啟動(dòng)子的控制下霍亂毒素B亞基因可以高效表達(dá),該啟動(dòng)子的存在可能是霍亂弧菌和大腸桿菌中CTB亞基的表達(dá)產(chǎn)量分別是CTA亞基的6倍和7倍的原因。
霍亂毒素B亞單位(www.absin.cn)基因(CtxB)序列長約380bp,一共編碼124個(gè)氨基酸,其中前21個(gè)氨基酸為信號(hào)肽序列。對(duì)CtxB基因編碼的124個(gè)氨基酸序列進(jìn)行計(jì)算機(jī)軟件二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)分析,前17個(gè)氨基酸具有明顯疏水性,形成一個(gè)a螺旋和一個(gè)b折疊。第21位的Gly和Thr親水性較強(qiáng),露于分子表面,有利于信號(hào)肽酶的切割。
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