葫蘆素 B 通過上調(diào) PTEN 抑制神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖。[Pubmed：25487942]

Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2014;18(21):3297-303.

葫蘆素屬于一類高度氧化的四環(huán)三萜類化合物。最近的研究表明，使用葫蘆素可以抑制癌細胞的進展。然而，葫蘆素-B 在神經(jīng)母細胞瘤細胞中的生物學作用仍未得到探索。
方法和結(jié)果：
采用MTT和BrdU（溴脫氧尿苷）摻入試驗測定葫蘆素-B的抗增殖作用。實時熒光定量PCR和Western blot檢測細胞周期調(diào)節(jié)因子的表達。使用小干擾 RNA （siRNA） 沉默 PTEN（磷酸酶和張力蛋白同源基因）的表達。我們發(fā)現(xiàn)葫蘆素-B 抑制了 SHSY5Y 細胞中細胞周期調(diào)節(jié)因子的生長并調(diào)節(jié)了細胞周期調(diào)節(jié)因子的表達。在分子水平上，我們發(fā)現(xiàn)葫蘆素-B通過上調(diào)PTEN來抑制AKT信號激活。事實上，使用 siRNA 寡核苷酸的 PTEN 缺乏癥削弱了葫蘆素 B 的抗增殖作用。
結(jié)論：
這些結(jié)果為一種可能有助于葫蘆素-B 在神經(jīng)母細胞瘤中的抗腫瘤作用的機制提供了證據(jù)。

通過 Gα13/RhoA/PKA 通路激活 VASP 介導葫蘆素 B 誘導的肌動蛋白聚集和絲切蛋白-肌動蛋白桿形成。[Pubmed：24691407]

PLoS 一。2014年4月1日;9（4）：e93547。

葫蘆素 B （CuB） 是葫蘆素三萜類化合物的一種有效的抗腫瘤劑，可誘導肌動蛋白細胞骨架的快速破壞和抑制癌變的異常細胞周期。然而，這種抗癌作用的潛在分子機制仍未完全了解。
方法和結(jié)果：
在這項研究中，我們發(fā)現(xiàn) CuB 處理在黑色素瘤細胞中形成高度有序的絲切蛋白-肌動蛋白桿之前，迅速誘導血管擴張劑刺激的磷蛋白 （VASP） 磷酸化（即激活），并產(chǎn)生 VASP 團塊，這些團塊與無定形肌動蛋白聚集體共定位。使用 PKA 特異性抑制劑 H89 敲低 VASP 或抑制 VASP 激活可抑制 CuB 誘導的 VASP 激活、肌動蛋白聚集和絲切蛋白-肌動蛋白桿形成。VASP激活是由cAMP非依賴性PKA激活介導的，因為CuB降低了cAMP的水平，而腺苷酸環(huán)化酶抑制劑MDL12330A對VASP激活的影響較弱。敲低 Gα13 或 RhoA 不僅抑制了 VASP 激活，而且改善了 CuB 誘導的肌動蛋白聚集并消除了絲切蛋白-肌動蛋白桿的形成。
結(jié)論：
我們的研究共同強調(diào)，CuB誘導的肌動蛋白聚集和cofilin-actin桿形成是通過Gα13/RhoA/PKA/VASP通路介導的。

葫蘆素 B 抑制缺氧誘導因子-1α 的翻譯表達。[Pubmed：24333213]

歐洲藥理學雜志。2014 1 月 15;723：46-54.

葫蘆素 B 是從 Trichosanthes kirilowii Maximowicz 中分離得到的三萜類化合物，因其抗腫瘤活性而被東方醫(yī)學使用。然而，葫蘆素B抑制腫瘤生長的機制尚不完全清楚。
方法和結(jié)果：
我們在這里證明了葫蘆素 B 對缺氧誘導因子-1 （HIF-1） 活化的影響。葫蘆素 B 對各種人癌細胞系中缺氧誘導的 HIF-1 激活具有有效的抑制活性。該化合物劑量依賴性地顯著降低了缺氧誘導的HIF-1α蛋白積累，而不影響HIF-1β的表達。進一步分析發(fā)現(xiàn)，葫蘆素B抑制HIF-1α蛋白合成，不影響HIF-1α mRNA的表達水平和HIF-1α蛋白的降解。相反，我們發(fā)現(xiàn)葫蘆素 B 抑制 HIF-1α 積累與哺乳動物雷帕霉素靶標 （mTOR） 及其效應(yīng)子核糖體蛋白 S6 激酶 （p70S6K） 和真核起始因子 4E 結(jié)合蛋白-1 （4E-BP1） 和細胞外信號調(diào)節(jié)激酶-1/2 （ERK1/2） 的強烈去磷酸化相關(guān)，該途徑已知在翻譯水平上調(diào)節(jié) HIF-1α 表達。葫蘆素 B 還激活了 Akt，這是已建立的 mTOR 抑制劑在許多腫瘤細胞中表現(xiàn)出的機制特征。此外，葫蘆素B可防止缺氧誘導的HIF-1靶基因表達，抑制腫瘤細胞的侵襲性。體內(nèi)研究進一步證實了葫蘆素 B 對 HIF-1α 蛋白表達的抑制作用，導致異種移植腫瘤模型中 HeLa 細胞生長減少。
結(jié)論：
葫蘆素B是HIF-1的有效抑制劑，為其抗癌活性機制提供了新的視角。

葫蘆素 B 顯著抑制生長并迅速影響多形性膠質(zhì)母細胞瘤的細胞骨架。[Pubmed： 18561312]

國際癌癥雜志。2008年9月15日;123(6):1364-75.

細胞系：U87、T98G、U118、U343 和 U373 細胞
濃度：0~1 μM
孵育時間：48 小時
方法：
對于增殖測量，將細胞放入 96 孔板中，并根據(jù)方案通過 MTT 測定在不同時間測量細胞生長。