| 體外 | 5,7,3'，4'-四甲氧基黃酮通過調(diào)節(jié) IRE1α 通路保護軟骨細胞免受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的細胞凋亡。[Pubmed：28436754 ]2018 年 3 月;59(2):157-166.研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （ER） 跨膜傳感器肌醇需求酶-1 （IRE1）α信號傳導在 ER 應激誘導的軟骨細胞凋亡中的作用，并確定 5,7,3'，4'-四甲氧基黃酮 （TMF） 的軟骨保護活性的分子機制。
方法與結(jié)果：
在大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨中采集的軟骨細胞中通過siRNA轉(zhuǎn)染敲低IRE1α。IRE1α 缺乏癥的軟骨細胞用衣霉素 （TM） 和 TMF 給藥。通過流式細胞術(shù)和 DAPI/TUNEL 染色定量軟骨細胞凋亡。分別通過定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（qRT-PCR）和蛋白質(zhì)印跡法定量mRNA和蛋白質(zhì)的表達。 IRE1α缺乏顯著增加TM誘導的軟骨細胞凋亡率，下調(diào)促生存因子XBP1S和Bcl-2的表達，上調(diào)促凋亡因子CHOP、p-JNK和caspase-3的表達。TMF 通過激活 IRE1α 的表達來抑制 TM 誘導的軟骨細胞凋亡，從而逆轉(zhuǎn)了 IRE1α 缺陷導致的下游促生存和促凋亡因子的表達模式。
結(jié)論：
TMF保護軟骨細胞免受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的細胞凋亡的機制可能與調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)傳感器IRE1α及其下游通路的活性有關(guān)。 同時定量分析12種具有黑素生成抑制活性的甲氧基黃酮，這些甲氧基黃酮來自小花山楠的根莖。[Pubmed：26711832 ]J Nat Med. 2016 年 4 月;70(2):179-89.來自Kaempferia parviflora Wall根莖的甲醇提取物。ex Baker （Zingiberaceae） 已顯示出對茶堿刺激的小鼠 B16 黑色素瘤 4A5 細胞的黑色素生成的抑制作用 （IC50 = 9.6 μg/mL）。
方法和結(jié)果：
在先前分離的25種黃酮類化合物和3種苯乙酮類化合物（1-28）中，包括5-羥基-7,3'，4'-三甲氧基黃酮（6，IC50=8.8μM），5,7,3'，4'-四甲氧基黃酮（7,8.6μM），5,3'-二羥基-3,7,4'-三甲氧基黃酮（12,2.9μM）和5-羥基-3,7,3'，4'-四甲氧基黃酮（13,3.5μM）在內(nèi)的幾種成分在有效濃度下顯示出抑制作用，無明顯的細胞毒性?；衔?、7、12和13抑制酪氨酸酶、酪氨酸相關(guān)蛋白（TRP）-1和TRP-2 mRNA的表達，這可能是其黑素生成抑制活性的機制。此外，使用HPLC開發(fā)了提取物中12種甲氧基黃酮（1、2、4-11、13和14）的定量分析方法。以MeOH-0.1 %乙酸溶劑水溶劑體系為流動相，在ODS色譜柱（粒徑3 μm，內(nèi)徑2.1 mm×100 mm）上，獲得分離和檢測這些成分的最佳條件，該方法的檢測限和定量限分別為0.08-0.66 ng和0.22-2.00ng。日內(nèi)和日間精度的相對標準差值分別低于0.95%和1.08%，所有黃酮類化合物的總體平均回收率為97.9-102.9%，所有校準曲線的相關(guān)系數(shù)在測試范圍內(nèi)均表現(xiàn)出良好的線性度。為了驗證該協(xié)議，評估了從泰國不同地區(qū)（Leoi，Phetchabun和Chiang Mai?。┦占娜N植物根莖的提取物。
結(jié)論：
結(jié)果表明，該測定具有可重復性、精確性，可用于植物材料的質(zhì)量評價。 |
| 體內(nèi) | 同位素標記法和超高效液相色譜-電噴霧電離-質(zhì)譜法鑒定大鼠尿液中5,7,3'，4'-四甲氧基黃酮代謝物。[Pubmed：22812915 ]農(nóng)業(yè)食品化學雜志 2012 年 8 月 22 日;60(33):8123-8.5,7,3'，4'-四甲氧基黃酮 （TMF） 是從小山楠中分離出的主要聚甲氧基黃酮 （PMF） 之一，據(jù)報道具有多種生物活性，包括抗真菌、抗瘧、抗分枝桿菌和抗炎活性。盡管已經(jīng)報道了幾項關(guān)于TMF的研究，但關(guān)于TMF代謝和TMF代謝物結(jié)構(gòu)的信息尚不清楚。
方法與結(jié)果：
本研究開發(fā)了一種用于鑒定TMF代謝物的同位素標記方法。合成了三種同位素標記的TMF（5,7,3'，4'-四甲氧基[3'-D（3）]黃酮，5,7,3'，4'-四甲氧基[4'-D（3）]黃酮和5,7,3'，4'-四甲氧基[5,4'-D（6）]黃酮）并給予大鼠。收集尿液樣本，采用超高效液相色譜-電噴霧電離-質(zhì)譜法監(jiān)測主要代謝產(chǎn)物。
結(jié)論：
5種TMF代謝物明確為3'-羥基-5,7,4'-三甲氧基黃酮、7-羥基-5,3'，4'-三甲氧基黃酮硫酸鹽、7-羥基-5,3'，4'-三甲氧基黃酮、4'-羥基-5,7,3'-三甲氧基黃酮和5-羥基-7,3'，4'-三甲氧基黃酮。 |