產品名稱：人乳腺癌細胞EFM192A
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人乳腺癌細胞EFM192A到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人乳腺癌細胞EFM192A培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人乳腺癌細胞EFM192A部分相關細胞如下：
YS2844 RCSMC 大鼠冠狀動脈平滑肌細胞RCSMC
YS2845 GOlig2 小鼠胚胎干細胞GOlig2
YS2846 LN299 人膠質瘤細胞LN299
YS2847 GT38 人胃癌細胞GT38
YS2848 GT39 人胃癌細胞GT39
YS2849 HcerEpic 人正常子宮頸上皮細胞HcerEpic
YS2850 RC92A 人前列腺癌細胞RC92A
YS2851 SLK 卡波西肉瘤細胞SLK
YS2852 HMCB 人黑色素瘤細胞HMCB
YS2853 IPEC1 豬小腸上皮細胞IPEC1
YS2854 HPCY5 人胰腺導管癌細胞HPCY5
YS2855 NEC 人食管癌細胞NEC
YS2856 OVSAHO 人卵巢癌細胞OVSAHO
YS2857 HMO6 人小膠質細胞HMO6
YS2858 SNU119 人卵巢癌細胞SNU119
YS2859 KM933 EB病毒轉化的人B淋巴細胞KM933
YS2860 NCIH2591 人肺癌細胞NCIH2591
YS2861 MuM2C 人眼脈絡黑色素瘤細胞MuM2C
YS2862 hCMECs 人心臟微血管內皮細胞hCMECs
YS2863 F98 大鼠膠質瘤細胞F98
YS2864 Ect1E6E7 人宮頸鱗狀細胞Ect1E6E7
YS2865 Hs832Tc 人卵巢良性腫瘤細胞Hs832.Tc
YS2866 HNE1 人鼻咽癌細胞HNE1
YS2867 HcaF 小鼠肝癌細胞HcaF
YS2868 H3396 人乳腺癌細胞H3396
YS2869 HCC1588 人肺鱗癌細胞HCC1588
YS2870 DANG 人胰腺癌細胞DANG
YS2871 Anip973 人肺腺癌細胞Anip973
YS2872 HOC 人肝卵圓細胞HOC
YS2873 SVOG 人卵巢顆粒細胞SVOG
YS2874 HGE 人牙齦上皮細胞HGE
YS2875 WEHI231 小鼠B淋巴瘤細胞WEHI231
YS2876 CCCESF1 人胚胎皮膚成纖維細胞CCCESF1
YS2877 HSC1 人皮膚鱗癌細胞HSC1
YS2878 NCIH128 人小細胞肺癌細胞NCIH128
YS2879 UMC11 人肺良性腫瘤細胞UMC11
YS2880 NCIH345 人小細胞肺癌細胞NCIH345
YS2881 RAT2 大鼠成纖維細胞RAT2
YS2882 CHG5 人惡性膠質瘤細胞CHG5
YS2883 RPTECTERT1 人腎近端小管上皮細胞RPTECTERT1
YS2884 67NR 小鼠乳腺癌細胞67NR
YS2885 LoMeTccRcc 人腎透明細胞癌細胞LoMeTccRcc
YS2886 HBEpiC 人支氣管上皮細胞HBEpiC
YS2887 RPMI8402 人急性T淋巴細胞白血病細胞RPMI8402
YS2888 HANK1 人NK/T細胞淋巴瘤細胞HANK1
YS2889 MFM223 人乳腺癌細胞MFM223
YS2890 SC 人急性單核細胞白血病細胞SC
YS2891 SUM52PE 人乳腺癌細胞SUM52PE
YS2892 LS123 人結腸腺癌細胞LS123
YS2893 KAT5 人甲狀腺乳頭狀癌細胞KAT5
YS2894 SF539 人膠質瘤細胞SF539
YS2895 SKLMS1 人陰戶平滑肌肉瘤細胞SKLMS1
YS2896 J774 小鼠巨噬細胞J774
YS2897 C41 人宮頸癌細胞C41
YS2898 SNU251 人卵巢內膜癌細胞SNU251
YS2899 RMabm 大鼠巨噬細胞RMabm
YS2900 SKRC52 人腎癌細胞SKRC52
YS2901 NCIH1668 人典型小細胞肺癌細胞NCIH1668
YS2902 DAKiKi 人B淋巴細胞DAKiKi
YS2903 Z310 大鼠脈絡從上皮細胞Z310
YS2904 38C13 小鼠B淋巴瘤細胞38C13
YS2905 Hs819T 人骨肉瘤細胞Hs819.T
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