產(chǎn)品名稱：人乳腺癌細(xì)胞COLO824
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人乳腺癌細(xì)胞COLO824到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人乳腺癌細(xì)胞COLO824培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人乳腺癌細(xì)胞COLO824部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1627 UPCI:SCC131 人舌頭鱗癌細(xì)胞UPCI:SCC131
YS1628 SC1 人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞SC1
YS1629 CMK 人原始巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞CMK
YS1630 U2940 人B細(xì)胞淋巴瘤U2940
YS1631 WILL2 人B細(xì)胞淋巴瘤WILL2
YS1632 /Fu97 人胃癌細(xì)胞/Fu97
YS1633 Hs766T 人胰腺癌細(xì)胞Hs766T
YS1634 RKOE6 人結(jié)腸癌細(xì)胞系RKOE6
YS1635 SW837 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞SW837
YS1636 RKOAS451 人結(jié)腸癌細(xì)胞RKOAS451
YS1637 RMGI 人卵巢癌細(xì)胞RMGI
YS1638 MOLP8 人多發(fā)性骨髓瘤MOLP8
YS1639 JJN3 人白血病細(xì)胞JJN3
YS1640 CL11 人結(jié)腸癌細(xì)胞CL11
YS1641 CL40 人結(jié)腸癌細(xì)胞CL40
YS1642 NCIH1755 人肺癌細(xì)胞NCIH1755
YS1643 MNNGHOSCl 人骨肉瘤細(xì)胞MNNGHOSCl
YS1644 NCIH727 人肺支氣管良性腫瘤NCIH727
YS1645 HSC2 人口腔鱗狀腫瘤細(xì)胞HSC2
YS1646 KMS11 人骨髓瘤細(xì)胞KMS11
YS1647 WILL1 人B細(xì)胞淋巴瘤WILL1
YS1648 HARAB 人肺腺癌細(xì)胞HARAB
YS1649 SKCO1 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞SKCO1
YS1650 HDQP1 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞HDQP1
YS1651 COLO824 人乳腺癌細(xì)胞COLO824
YS1652 HCC1428 人乳腺癌細(xì)胞HCC1428
YS1653 CAL148 人乳腺癌細(xì)胞CAL148
YS1654 RCK8 人B細(xì)胞淋巴瘤RCK8
YS1655 NCIBL2009 人淋巴母細(xì)胞瘤(EBV轉(zhuǎn)化)NCIBL2009
YS1656 LCLC97TM1 人大細(xì)胞肺癌LCLC97TM1
YS1657 EBC1 人肺腺癌細(xì)胞EBC1
YS1658 NCIH1373 人肺腺癌細(xì)胞stage3ANCIH1373
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