花青素是一組天然存在的酚類化合物,可作為多種植物、花卉和水果中的著色劑。這些色素作為質(zhì)量指標(biāo)、化學(xué)成型標(biāo)志物和抗氧化劑具有重要意義。方法和結(jié)果:采用窄口徑HPLC色譜柱,采用HPLC/ESI/MS方法研究黑莓(Rubus種)汁液的含量。使用這種方法,我們證明了矢車菊素-3-O-葡萄糖苷約占黑莓提取物中總花青素含量的80%。在這里,我們研究了黑莓汁和矢車菊素-3-O-葡萄糖苷對(duì)暴露于過(guò)氧亞硝酸鹽的細(xì)胞和血管環(huán)中內(nèi)皮功能障礙的抗氧化活性。在體外的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)中,過(guò)氧亞硝酸鹽引起線粒體呼吸的顯著抑制(38 +/- 2.1%的對(duì)照細(xì)胞),通過(guò)染料MTT向甲瓣的線粒體依賴性轉(zhuǎn)化來(lái)測(cè)量。過(guò)氧亞硝酸鹽引起 DNA 鏈斷裂(63 +/- 1.9% 單鏈與對(duì)照細(xì)胞中 3 +/- 0.9% 單鏈),如堿性展開(kāi)測(cè)定法測(cè)量,并引起 PARS 的活化,通過(guò)將放射性標(biāo)記的 NAD(+) 摻入核蛋白來(lái)測(cè)量。黑莓汁(含有 80 ppm 的不同稀釋度;40 頁(yè)/分鐘;14.5 ppm 的矢車菊丁-3-O-葡萄糖苷)和矢車菊丁-3-O-葡萄糖苷(氯化物)(0.085 μM;0.028 μM;0.0085 μM)降低了過(guò)氧亞硝酸鹽誘導(dǎo)的對(duì) HUVEC 中線粒體呼吸、DNA 損傷和 PARS 激活的抑制。暴露于過(guò)氧亞硝酸鹽的血管環(huán)對(duì)乙酰膽堿表現(xiàn)出內(nèi)皮依賴性松弛劑反應(yīng)減少,對(duì)去甲腎上腺素反應(yīng)表現(xiàn)出血管收縮功能障礙。黑莓汁(含有 80 ppm 的不同稀釋度;40 頁(yè)/分鐘;14.5ppm的矢車菊丁-3-O-葡萄糖苷)和矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(如珽化菊丁-3-O-葡萄糖苷氯化物)(0.085μM;0.028微米;0.0085微米)。結(jié)論:總之,我們的研究結(jié)果清楚地表明,含有矢車菊素-3-O-葡萄糖苷的黑莓汁是過(guò)氧亞硝酸鹽的清除劑,對(duì)過(guò)氧亞硝酸鹽誘導(dǎo)的內(nèi)皮功能障礙和血管衰竭具有保護(hù)作用。
采用超聲輔助萃取和多種色譜技術(shù)從甜菜糖蜜中分離純化了3種多酚,并通過(guò)光譜分析闡明了其結(jié)構(gòu)。采用甲基噻唑基四唑鎓(MTT)法、流式細(xì)胞術(shù)、半胱天冬酶-3活性法和蛋白質(zhì)印跡法測(cè)定細(xì)胞毒性和分子機(jī)制。結(jié)果表明,沒(méi)食子酸、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物和表兒茶素對(duì)人結(jié)腸、肝細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞具有細(xì)胞毒性。矢車菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物對(duì)各種腫瘤細(xì)胞系具有細(xì)胞毒性,特別是對(duì)結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞具有細(xì)胞毒性,體外半最大抑制濃度(IC50)值為23.21±0.14μg/mL。珊化菊酯-3-O-葡萄糖苷氯化物可能是治療結(jié)腸癌的潛在候選藥物。在機(jī)制研究中,矢車菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物增加了Caco-2細(xì)胞上G0/G1期細(xì)胞周期的比值,降低了細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)。矢車菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物降低突變體p21表達(dá),增加Bax/Bcl-2的比值和caspase-3的激活誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
本研究采用超聲輔助萃取甜菜糖蜜(SBM)制備酚類化合物。方法和結(jié)果:提取柱層析后生成沒(méi)食子酸(GA)、珊化物-3-O-葡萄糖苷(CGC)和表兒茶素(EP),并采用NMR、QTOF-MS和ESI-MS/MS進(jìn)一步檢測(cè)。 3種化合物均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性,包括DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性和ORAC值。GA表現(xiàn)出最強(qiáng)的抗氧化活性??鼓[瘤活性以劑量依賴性方式顯著增加。特別是,在最高濃度為400 μg/mL的提取物下,CGC對(duì)人結(jié)腸癌(CACO-2)、肝細(xì)胞癌(HepG2)和乳腺癌(MCF-7)細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制活性分別為94.86%、87.27%和67.13%。這些結(jié)果表明,這三種化合物是制備食品工業(yè)中功能性食品的關(guān)鍵化學(xué)成分。結(jié)論:研究結(jié)果表明,SBM是制備功能性食品的抗氧化劑和抗腫瘤劑的天然來(lái)源。
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王玲