一、簡介 His 標(biāo)簽蛋白（競爭法）快速檢測試劑盒是基于膠體金側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)的蛋白半定量檢測 試劑。主要結(jié)構(gòu)由樣品墊、金標(biāo)墊、層析膜、吸水紙、背板等組成。在層析膜上固定有金標(biāo) 抗體的二抗（質(zhì)控線）和帶有 His-tag 的蛋白（檢測線）；在金標(biāo)墊上固定有膠體金標(biāo)記的 抗 His-Tag 的單克隆抗體。當(dāng)待測樣品滴加到樣品墊時(shí)，通過毛細(xì)作用，液體向金標(biāo)墊移動。 當(dāng)不含有 His-Tag 蛋白的待測樣品通過金標(biāo)墊時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體隨著層流移動到檢測線 位置，與固定在檢測線上的帶有 His-tag 的蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，并在檢測線上形成酒紅色 條帶；當(dāng)含有 His-Tag 蛋白的待測樣品通過金標(biāo)墊時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體與待測樣本中的 His-Tag 蛋白發(fā)生特異性的結(jié)合，樣本中含有的 His-Tag 蛋白越多，與之結(jié)合的金標(biāo) His-Tag 抗體越多，剩余的游離 His-Tag 金標(biāo)抗體越少，隨著層流移動到檢測線位置，游離的 His-Tag 金標(biāo)抗體與固定在檢測線上的帶有 His-tag 的蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，并在檢測線上形成淡淡 的酒紅色條帶或者不顯帶。當(dāng)復(fù)合物移動到質(zhì)控線時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體被包被在質(zhì)控線的 金標(biāo)抗體二抗所捕獲，并在質(zhì)控線上形成酒紅色條帶。通過判讀層析膜上檢測線和質(zhì)控線是 否顯色及顯色的強(qiáng)弱，判斷樣品中是否存在 His-Tag 蛋白。本試劑檢測下限為10ug/mL，即 當(dāng)待測樣品中 His-Tag 蛋白的濃度達(dá)到10ug/ml 及以上濃度時(shí)，檢測線的強(qiáng)度會被有效的削 弱，顯示出淡淡的酒紅色條帶或不顯色。當(dāng)檢測樣品中 His-Tag 蛋白濃度在10ug/mL 至 100ug/mL 時(shí)，檢測線顏色的深淺與樣品中 His-Tag 蛋白的濃度呈負(fù)相關(guān)。當(dāng)樣本中的 His-Tag 蛋白濃度達(dá)到100ug/ml 以上時(shí)，檢測線發(fā)生消線即無肉眼可見條帶出現(xiàn)。