中文名：單組分TMB顯色液
英文名：3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine (TMB) Liquid Substrate System for ELISA
中文別名：單組分TMB過氧化物酶底物液 | ELISA 用 3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 液體底物系統(tǒng)
純度：過氧化物酶底物
貨號：T117926
包裝：25ml、100ml、500ml
存儲溫度：2-8°C儲存
產(chǎn)品介紹：
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過氧化物酶底物，用于ELISA 反應(yīng)。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍(lán)色的末端產(chǎn)物，可在370 或 655 nm在分光光度計上讀取。TMB反應(yīng)可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止，450 nm讀取。
使用方法?
使用之前，以超純水反復(fù)洗滌的適當(dāng)容器，倒出適量單組分TMB底物溶液，待溶液達(dá)到室溫即可使用。
加液：加完HRP結(jié)合物并溫育一定時間后，洗板3－5次，每孔加TMB底物100－150uL， 37°C 避光溫育15-30分鐘（可根據(jù)實驗需求延長以獲得預(yù)期顯色） 。
終止（備選）：加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來終止反應(yīng)。酶標(biāo)孔中反應(yīng)液從藍(lán)色變?yōu)辄S色。
讀數(shù)：終止反應(yīng)后，30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)。不加終止液，可以在620－650nm處讀數(shù)。
注意： 降低底物強(qiáng)度：如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀，表明TMB底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀，可以在加入終止液后馬上讀數(shù)；另外，可以進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色，推薦進(jìn)一步降低一抗和/或HRP結(jié)合物的濃度，盡量避免降低底物濃度。
動力學(xué)檢測：TMB單組分底物在與過氧化物酶反應(yīng)時產(chǎn)生一種藍(lán)色，可以在加底物后620－650nm處讀數(shù)，不需終止反應(yīng)。
穩(wěn)定性：2－8°C條件下，大于18個月。
敏感性：相當(dāng)于顯色AB雙液，或 TMB因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應(yīng)用。單組分TMB過氧化物酶底物與辣根過氧化物酶連接物反應(yīng)時產(chǎn)生一種深藍(lán)色的產(chǎn)物，適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中。
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