名稱 TMB顯色液(沉淀型，組化或膜HRP顯色用)
規(guī)格 100mL | 500mL
存儲 4℃避光保存；一年有效。

產(chǎn)品簡介 
TMB，即 3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine，是辣根過氧化物酶（HRP）的常用底物。在辣根過氧化物酶或其他適當(dāng)過氧化物酶的催化下，TMB 會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。Phygene的TMB 顯色液（沉淀型，組化或膜HRP顯色用，TMB Color Development Solution for IHC or Blotting）采用最新的單一溶液的TMB 顯色技術(shù)，用于Western 或免疫組化等 HRP的顯色檢測，簡化了操作步驟，并且使檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本顯色液具有高靈敏性，與HRP反應(yīng)后產(chǎn)生藍(lán)紫色沉淀，沉淀吸附于印跡膜上，不會脫落，方便顯色結(jié)果的保存和觀察。由于產(chǎn)生的是沉淀型藍(lán)色產(chǎn)物，不適用于ELISA檢測。

用于免疫組化檢測時，如果每個樣品的顯色液用量為0.1ml，則可以檢測1000個樣品；對于膜的顯色檢測，如果每次使用2.5 ml顯色液，則可以檢測40次。

特點：

方便：無需其他試劑,直接使用;也無需特別的設(shè)備，能直接觀察；
靈敏：獨特的配方,顯色時間短,對超微量的HRP都能檢測，不像4-CN等那樣會褪色；
安全：不含任何有機溶劑，也無需用有機溶劑稀釋；
穩(wěn)定：4℃避光保存至少1年有效。


使用說明 

如果發(fā)現(xiàn)TMB顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍(lán)色，應(yīng)該停止使用。

一. 免疫組化檢測：

1. 參考免疫組化的實驗步驟，在與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后，用適當(dāng)洗滌液（如PBS）洗滌3-5次，每次3-5分鐘。
2. 洗滌完畢后，去除洗滌液，滴加約100微升TMB顯色液。
3. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長時間(可在濕盒中顯色過夜)，直至顯色至預(yù)期深淺。
4. 去除染色液，加入重蒸水孵育10分鐘以終止反應(yīng)。
5. 拍照記錄或適當(dāng)封片后拍照記錄。如果有必要，可以使用中性紅染色液進行復(fù)染后再進行拍照記錄或適當(dāng)封片后拍照記錄。

二. 膜的HRP顯色檢測：

1. 參考相應(yīng)的實驗步驟，在與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次5分鐘左右。
2. 洗滌完畢后，去除洗滌液，
3. 滴加約適量TMB顯色液充分覆蓋膜。
4. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長時間(可長達(dá)數(shù)小時)，直至顯色至預(yù)期深淺。
5. 直接拍照記錄。

常見問題 


一. 背景顯色太深。
1. 如果背景顯色太深，一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進行封閉，例如選購適當(dāng)?shù)姆忾]液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面，請選購經(jīng)過適當(dāng)吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。
2. 可以考慮縮短顯色時間，或降低二抗?jié)舛取Ａ硗?，選擇適當(dāng)強度的洗滌液，或延長洗滌時間也會有所幫助。

二. 沒有顯色或顯色太弱。

1. 適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。在離心管內(nèi)用稀釋的二抗與染色液反應(yīng)，檢測二抗是否可以被正常顯色。
2. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系，例如使用生物素檢測體系。
3. 可以適當(dāng)延長顯色時間。
4. 如果上述改進不能獲得預(yù)期效果，對于免疫組化或Western，可以考慮更換效果更好的一抗；對于Southern、Northern或原位雜交，則可以考慮更換探針。

注意事項 

1）TMB 對人體有刺激性，請注意適當(dāng)防護。
2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。