產(chǎn)品名稱：人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC70

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC70收到后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC70培養(yǎng)步驟

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC70部分相關(guān)細(xì)胞如下：

YS1514 NCIH1781 人細(xì)支氣管肺泡癌細(xì)胞NCIH1781

YS1515 NCIH1581 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1581

YS1516 HBEC5i 人大腦內(nèi)皮細(xì)胞HBEC5i

YS1517 HuNS1 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞HuNS1

YS1518 RL 人B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞RL

YS1519 MD 人脾細(xì)胞MD

YS1520 RC 人B淋巴瘤細(xì)胞RC

YS1521 SW684 人纖維肉瘤細(xì)胞SW684

YS1522 PhoenixECO 人逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系PhoenixECO

YS1523 BICR3 人舌鱗狀細(xì)胞癌BICR3

YS1524 OE19 人食管癌細(xì)胞OE19

YS1525 SNU601 人印戒細(xì)胞胃腺癌SNU601

YS1526 SNU1066 人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU1066

YS1527 SNU46 人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU46

YS1528 MNT1 人黑色素瘤細(xì)胞MNT1

YS1529 HARSpondin1FcHEK293Tcells 人穩(wěn)定表達(dá)RspoI蛋白的293T細(xì)胞HARSpondin1FcHEK293Tcells

YS1530 MUGChor1 人骶骨脊索瘤細(xì)胞MUGChor1

YS1531 SNU899 人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU899

YS1532 SNU1076 人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU1076

YS1533 TK6 人成淋巴細(xì)胞/遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥TK6

YS1534 LUDLU1 人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞LUDLU1

YS1535 UMChor5 人顱底脊索瘤細(xì)胞UMChor5

YS1536 MP46 人眼葡萄膜黑色瘤細(xì)胞MP46

YS1537 NCIH187 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH187

YS1538 MOLT3 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞MOLT3

YS1539 LL97A(AlMy) 人肺成纖維細(xì)胞-原發(fā)性肺纖維化LL97A(AlMy)

YS1540 SW962 人外陰癌細(xì)胞SW962

YS1541 SW872 人脂肪肉瘤細(xì)胞SW872

YS1542 NALM1 人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞NALM1

YS1543 NCIH2030 人肺腺癌細(xì)胞NCIH2030

YS1544 Loucy 人急性T淋巴細(xì)胞白血病Loucy

YS1545 NTERA2 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞NTERA2

YS1546 HCC1395 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC1395

YS1547 SKNO1 人急性髓系白血病細(xì)胞SKNO1

YS1548 NTERA2clD1 人睪丸癌細(xì)胞NTERA2cl.D1

YS1549 Huh1 人肝癌細(xì)胞Huh1

YS1550 HCC1806 人乳腺鱗狀癌細(xì)胞（三陰性）HCC1806

YS1551 OCILy7 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞OCILy7

YS1552 HCC1954 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞TNMIIA期，3級www.atcc.org/products/crl-2338HCC1954

YS1553 BT20 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20

YS1554 LAPC4 人前列腺癌細(xì)胞LAPC4

YS1555 OPM2 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞OPM2

YS1556 SUDHL8 人B細(xì)胞淋巴瘤SUDHL8

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