"HCC70:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

P3-NS1/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞

NIH:OVCAR-10細胞類似產(chǎn)品：：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞

Panc8.13細胞類似產(chǎn)品：：GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞

SW954細胞類似產(chǎn)品：：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HCC70:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

UACC-812細胞類似產(chǎn)品：：HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞

THP 1細胞類似產(chǎn)品：：HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞

H9細胞類似產(chǎn)品：：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCC70:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

HCCC-9810細胞類似產(chǎn)品：：ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

SCL2細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞

HCC-1806細胞類似產(chǎn)品：：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞

KBM-7/Hap8細胞類似產(chǎn)品：：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞

MTC-TT細胞類似產(chǎn)品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

T-84細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞

DI TNC1細胞類似產(chǎn)品：：H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞

H841細胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

Lieming Xu-2細胞類似產(chǎn)品：：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞

hFOB1.19細胞類似產(chǎn)品：：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞

EB-2細胞類似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞

C918細胞類似產(chǎn)品：：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞

NTera2 cl.D1細胞類似產(chǎn)品：：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞

DMS-273細胞類似產(chǎn)品：：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞

COLO 320F細胞類似產(chǎn)品：：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞

COLO 320F細胞類似產(chǎn)品：：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞

KY-50細胞類似產(chǎn)品：：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞

BC-3H-1細胞類似產(chǎn)品：：H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞

KOSC2細胞類似產(chǎn)品：：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞

HuT-102細胞類似產(chǎn)品：：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞

RPE1細胞類似產(chǎn)品：：WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞

M619細胞類似產(chǎn)品：：H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞

COR-L23細胞類似產(chǎn)品：：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞

HCC70:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Hs 445細胞類似產(chǎn)品：：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

LM-TK-細胞類似產(chǎn)品：：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞

Bx-PC3細胞類似產(chǎn)品：：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞

SNB.19細胞類似產(chǎn)品：：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞

Renal Carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞

H-28細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞

BL2141細胞類似產(chǎn)品：：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞

SKO007細胞類似產(chǎn)品：：L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞

NCI-SNU-387細胞類似產(chǎn)品：：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞

Tb 1-Lu細胞類似產(chǎn)品：：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞

SK-NSH細胞類似產(chǎn)品：：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞

OV90細胞類似產(chǎn)品：：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞

HIT T15細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產(chǎn)品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

SDBMSC細胞類似產(chǎn)品：：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞

SU-DHL-1細胞類似產(chǎn)品：：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞

NCIH1623細胞類似產(chǎn)品：：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞

293-FT細胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞

MDCC-MSB-1細胞類似產(chǎn)品：：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞

Hs 870.T細胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞

MC 116細胞類似產(chǎn)品：：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞

CNE1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

NCI-H2073細胞類似產(chǎn)品：：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞

G361-mel細胞類似產(chǎn)品：：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞

H2291細胞類似產(chǎn)品：：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞

IALM細胞類似產(chǎn)品：：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞

WERI Rb-1細胞類似產(chǎn)品：：LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞

PVEC細胞類似產(chǎn)品：：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞

HEP3B2細胞類似產(chǎn)品：：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞

Hs 870.T細胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞

2BS細胞類似產(chǎn)品：：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞

INS-1E細胞類似產(chǎn)品：：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞

H341細胞類似產(chǎn)品：：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞

CALU 1細胞類似產(chǎn)品：：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞

BA/F3細胞類似產(chǎn)品：：DSL-6A-C1細胞、PANC-03-27細胞、MDA-361細胞

HEC1-A細胞類似產(chǎn)品：：C33A細胞、DV90細胞、BHP-10細胞

SCL2細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、SKG IIIa細胞、TEV-1細胞

HOMEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞

U251n細胞類似產(chǎn)品：：IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞

NCI-H1666細胞類似產(chǎn)品：：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞

WM115mel細胞類似產(chǎn)品：：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞

NHLF細胞類似產(chǎn)品：：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞

Huh7.5細胞類似產(chǎn)品：：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞

D283 Med細胞類似產(chǎn)品：：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞

H-2029細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞

Ramos G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞

HEI-193細胞類似產(chǎn)品：：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞

C8D1A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞

MHHCALL2細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞

SU-DHL-5細胞類似產(chǎn)品：：WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞

Merwin Plasma Cell tumor-11細胞類似產(chǎn)品：：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞

HOCF細胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞

IPECJ2細胞類似產(chǎn)品：：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞

WEHI-3細胞類似產(chǎn)品：：BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞

HCC-202細胞類似產(chǎn)品：：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞

BBE細胞類似產(chǎn)品：：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞

Roswell Park Memorial Institute 7666細胞類似產(chǎn)品：：G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞

Hs-600-T細胞類似產(chǎn)品：：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞

BC3H-1細胞類似產(chǎn)品：：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞

KYSE 30細胞類似產(chǎn)品：：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞

GL-261細胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞

NCI-H322T細胞類似產(chǎn)品：：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞

LP-1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞

P3JHR-1細胞類似產(chǎn)品：：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞

SBC-3細胞類似產(chǎn)品：：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞

HCV 29細胞類似產(chǎn)品：：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞

WM266-4細胞類似產(chǎn)品：：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞

NCIH1417細胞類似產(chǎn)品：：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞

OCI-AML-5細胞類似產(chǎn)品：：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞

LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞

AG06814-N細胞類似產(chǎn)品：：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞

HuH6細胞類似產(chǎn)品：：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞

L-cell細胞類似產(chǎn)品：：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞

CMT-93細胞類似產(chǎn)品：：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞

GDM-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞

mRMEC細胞類似產(chǎn)品：：A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞

SW 1271細胞類似產(chǎn)品：：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞

ME 180細胞類似產(chǎn)品：：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞

COLO320DM細胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞

H-1435細胞類似產(chǎn)品：：YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞

K1735細胞類似產(chǎn)品：：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞

HCC70:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HIEC6細胞類似產(chǎn)品：：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞

NCIH209細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞

SNU-119細胞類似產(chǎn)品：：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞

Centre Antoine Lacassagne-27細胞類似產(chǎn)品：：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞

HSC細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞

TERT-RPE1細胞類似產(chǎn)品：：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞

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