產(chǎn)品名稱

抗體快速酶切F(ab′)2制備試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)

ZXLFAB-1100A

包裝規(guī)格

1次/盒(0.5mgIgG/次)

預(yù)期用途

適用于人、兔、小鼠和其他物種和亞類的IgG酶切,得到F(ab')₂ 的片段。適用于化學(xué)發(fā)光、Elisa、免疫印跡(WB)、免疫組化、細(xì)胞學(xué)、單分子等免疫檢測(cè)系統(tǒng)中靈敏度、穩(wěn)定性、干擾、相關(guān)性等問(wèn)題改善。

原理

本試劑盒采用高活性的胃蛋白酶活化物質(zhì),結(jié)合簡(jiǎn)約高效的濾過(guò)裝置,選擇性酶切人、兔、小鼠和其他物種和亞類的 IgG的 Fc 部分,得到保留抗原結(jié)合活性的 F(ab')2 的片段。

主要組成成分

(1)R1試劑:抗體稀釋處理劑      1支

(2)R2試劑:抗體酶切緩沖液      1支

(3)R3試劑:胃蛋白酶活化物質(zhì)    1支

(4)R4試劑:胃蛋白酶溶解液      1支

(5)R5試劑:酶切終止緩沖液      1瓶

(6)M1設(shè)備:濾過(guò)濃縮管    1支

下列試劑或儀器標(biāo)記操作時(shí)需要,但不包含在本試劑盒中:

(1)移液器:10μL、200μL、1mL

(2)37±1℃水浴鍋或培養(yǎng)箱

(3)震蕩儀

(4)離心機(jī)

儲(chǔ)存條件及有效期

(1)儲(chǔ)存有效期:2~8℃條件下,有效期為12個(gè)月;

(2)R3試劑≤ -20℃保存;

(3)生產(chǎn)日期和使用期限:詳見產(chǎn)品外包裝標(biāo)簽。

方法和步驟

(1)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1)請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書,本試劑盒可進(jìn)行1次標(biāo)記實(shí)驗(yàn),每次標(biāo)記實(shí)驗(yàn)的 標(biāo)記量為0.5mg,可接受標(biāo)記量為0.5-1mg。

2)將處于冷凍或冷藏狀態(tài)的試劑盒組分提前恢復(fù)室溫。

3)將R3試劑進(jìn)行瞬時(shí)離心以確保固體物處于管底。

4)請(qǐng)打開水浴鍋或培養(yǎng)箱,并設(shè)置工作溫度為37±1℃。

5)濾過(guò)濃縮管加入0.5mL純化水,8000 g離心5min潤(rùn)洗一次,收集管和濾芯內(nèi)殘留的純化水倒入廢液桶。

(2)標(biāo)準(zhǔn)操作方法

1)取0.5mg抗體至反應(yīng)管,使用抗體稀釋處理劑定容至0.5mL。

注意:如果抗體>0.5mg,仍是定容至0.5mL

2)使用移液器加入25 μL抗體酶切緩沖液,輕輕吹打或振蕩混勻。

3)將R3試劑使用R4試劑溶解,震蕩混勻后立即取2μL加入步驟2)中,輕輕吹打混勻;

4)用封口膜將反應(yīng)管密封并置37℃±1℃孵育40min;

5)孵育結(jié)束加入30 μL酶切終止緩沖液,輕輕吹打混勻;

6)反應(yīng)管內(nèi)所有的液體轉(zhuǎn)移至濾過(guò)濃縮管,8000 g離心5min,棄廢液,濾過(guò)濃縮管內(nèi)加入300 μL R1試劑,輕輕吹打混勻、離心;重復(fù)該步驟3次;

7)使用移液器連續(xù)輕輕吹打20次以充分回收標(biāo)記物。將濾過(guò)濃縮管內(nèi)溶液全部轉(zhuǎn)移至凍存管內(nèi)。此回收溶液即為酶切后的 F(ab')2 片段溶液,可根據(jù)需要進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)應(yīng)用或保存。

常見問(wèn)題解釋

(1)哪些抗體可以使用本試劑盒進(jìn)行酶切處理?

人、兔、小鼠和其他物種和亞類的 IgG。

滿足以上兩個(gè)條件的蛋白均能使用本試劑盒標(biāo)記。若待標(biāo)記物不滿足以上條件,請(qǐng)選擇本公司其他規(guī)格的標(biāo)記試劑盒。

(2)本試劑盒可酶切處理多少mg抗體?

本試劑盒可進(jìn)行1次酶切實(shí)驗(yàn),每次酶切實(shí)驗(yàn)的 抗體量為0.5mg?？山邮艿拿盖锌贵w量為0.5-1mg。如果需要酶切的抗體量更大,請(qǐng)選擇本公司其他規(guī)格的酶切試劑盒。

(3)本試劑盒標(biāo)記后的蛋白儲(chǔ)存條件?

長(zhǎng)期保存≤-20℃;短時(shí)間內(nèi)(≤7天)2-8℃保存。如有需要,請(qǐng)選擇本公司推薦的蛋白保存液。

(4)本試劑盒酶切后F(ab')2 的片段純化效果如何?

首先,經(jīng)本公司驗(yàn)證,按說(shuō)明書操作后抗體IgG可完全被酶切消化,因此酶切產(chǎn)物中IgG可忽略不計(jì)。酶切產(chǎn)物包括F(ab')2 片段、大量 Fc小肽片段和少許的胃蛋白酶,其中通過(guò)濾過(guò)裝置處理后,大量 Fc小肽片段和少許的胃蛋白酶可被大部分去除,得到純度較高的F(ab')2 片段。如果酶切的抗體量比較大的、條件允許的情況下,建議使用凝膠純化系統(tǒng)進(jìn)行純化。

(5)如有其他問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系本公司技術(shù)支持。

注意事項(xiàng)

(1)使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。如有疑問(wèn)請(qǐng)先與技術(shù)支持確認(rèn)后開始實(shí)驗(yàn)。

(2)請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用本試劑盒。

(3)使用本試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢液請(qǐng)及時(shí)密封、處理。

(4)本試劑盒供科學(xué)研究領(lǐng)域的專業(yè)人員使用。

(5)本試劑盒僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用,不得用于臨床診斷或臨床ZL,不得用于食品或藥品,不得儲(chǔ)存在普通民房住宅內(nèi)。

(6)使用本試劑盒時(shí),請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴口罩和一次性手套。

基本信息

無(wú)錫子曉生物科技有限公司

Wuxi ZIJOY Biotechnology Co., Ltd

地址:無(wú)錫市惠山區(qū)智慧路1號(hào)4號(hào)樓

技術(shù)支持:2076028640@qq.com

訂貨熱線:17200902831

*本試劑盒僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用!

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