SDS-PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒
產(chǎn)品及特點SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì) 的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此本公司開發(fā)了 SDS-PAGE 彩色快速凝膠制備試劑盒。本產(chǎn)品配套提供改良型過硫酸銨催化劑溶液,提高 了過硫酸銨溶液的穩(wěn)定性和催化效能。它具有下列特點:
1. 使用本產(chǎn)品凝膠制備試劑無需加入有極臭異味且有毒的 TEMED 試劑,只 需加入過硫酸銨即可凝膠,使研究人員可避免因操作 TEMED 而帶來的不 快和對健康的影響。
2. 配制一塊或多塊凝膠最少只需 2 分鐘的動手操作時間。
3. 特有顏色配方的濃縮膠,使點樣孔清晰易辨,方便點樣。
4. 本試劑盒約可配制 100 塊常規(guī) mini 的 SDS-PAGE 膠(1mm)。
5. 本產(chǎn)品限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用 于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6. 操作時請穿實驗服并戴一次性手套和口罩。
規(guī)格及成分 成 份 編號 大扁盒包裝
10%SDS-PAGE 分離膠 A 液 LM190903a 250mL
10%SDS-PAGE 分離膠 B 液 LM190903b 250mL
5%SDS-PAGE 彩色濃縮膠 A 液 LM190903c 80mL
5%SDS-PAGE 彩色濃縮膠 B 液 LM190903d 80mL
TEMED LM100880 5 mL(棕色管)
過硫酸銨(干粉) LM100879 10 g(棕色管)
使用手冊 LM190903sc 1 份
運輸及保存 常溫運輸,請將此過硫酸銨溶液保存于-20℃。為方便吸取使用,已開蓋使用中 的過硫酸銨溶液可置于 4℃保存。保存期限為一年。
自備試劑 水或醇。 使用方法 一、以一塊 1.0mm 的 mini 膠為例。
1. 取等體積分離膠 A 液和分離膠 B 液混勻,即取兩種溶液各 2.5ml。
2. 往步驟 1 中的混合溶液中加入 50μl 的改良型過硫酸銨溶液,混勻。
3. 將混勻后的溶液注入制膠玻璃板中,加入適量水或醇(如乙醇、正丁醇等) 覆蓋于分離膠之上。
4. 待分離膠凝固后,倒去上層水或醇。
5. 取等體積濃縮膠 A 液和濃縮膠 B 液混勻,即取兩種溶液各 0.75 ml,15μl 的改良型過硫酸銨溶液,混勻。
6. 注入制膠玻璃板中,插入梳齒。
7. 待濃縮膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。 二、注意事項 1. 改良型過硫酸銨溶液的使用量僅作參考,實際用量可根據(jù)個人實驗習(xí)慣和 經(jīng)驗增加或減少。加入較多量的過硫酸銨可加快凝膠速度,反之亦然。
2. 本產(chǎn)品已加入適量 TEMED 的替代品,如需進一步加快凝膠速度,臨配膠 前可按需補充適量 TEMED。
3. 凝膠過程中產(chǎn)生氣泡的原因:空氣在溶液中的溶解度隨著溫度的升高而降 低;低溫儲存的溶液溶解較多的空氣;凝膠的凝聚是一個放熱反應(yīng),同時低溫 溶液在室溫環(huán)境下緩慢吸熱。兩者共同促成凝膠溫度的升高,使得其溶解的空 氣因溶解度降低而釋放出來,形成氣泡。因此,在將凝膠溶液灌制到玻璃板中 之前,使之平衡到室溫(如放置幾分鐘),可有效避免凝膠中氣泡的形成。
4. 盡管整個凝固反應(yīng)是一個放熱反應(yīng),但是這是一個多步驟的反應(yīng),最初反 應(yīng)的觸發(fā)仍然需要較多的熱能。實踐證明,膠的凝固與溫度有顯著的正相關(guān)性。 同等條件下,溫度越高,凝固速度越快。如 25℃時的凝固速度要顯著快于 15℃ 時的凝固速度。同理,在 37℃時,凝固速度會進一步加快。
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