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miRNA小量制備試劑盒,miRNA miniprep Kit
  • miRNA小量制備試劑盒,miRNA miniprep Kit

aladdin 阿拉丁 M598102 miRNA小量制備試劑盒

價(jià)格 12321.90 2934.90
包裝 250t 50t
最小起訂量 50t
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-11-29
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產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):miRNA小量制備試劑盒英文名稱(chēng):miRNA miniprep Kit
品牌: 阿拉丁產(chǎn)地: 上海
保存條件: 室溫產(chǎn)品類(lèi)別: 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)純化色譜
運(yùn)輸條件: 常規(guī)運(yùn)輸產(chǎn)品規(guī)格: 250t、50t
貨號(hào): M598102是否進(jìn)口:
2024-11-29 miRNA小量制備試劑盒 miRNA miniprep Kit 250t/12321.90RMB;50t/2934.90RMB 12321.90 阿拉丁 上海 室溫 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)純化色譜

中文名:miRNA小量制備試劑盒

英文名:miRNA miniprep Kit

貨號(hào):M598102

包裝:250t、50t

存儲(chǔ)溫度:室溫

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒用于從各種動(dòng)物組織、植物組織和細(xì)胞中提取miRNA。提取的miRNA 分子完整、純度高,適用于Northern Blot 、Real-TimePCR、miRNA微列陣芯片、原位雜交、RNase保護(hù)測(cè)定等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

組分:

應(yīng)用范圍:

核酸提取及純化

使用方法:
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
1.所有試劑用DEPC處理過(guò)的溶劑配制。請(qǐng)選用RNase-free槍頭和離心管,以避免提取過(guò)程中RNA被RNase降解。
2.70%乙醇,- 20C預(yù)冷。
二、操作步驟:
不同的樣品提取miRNA的操作中略有區(qū)別,具體步驟分述如下:
【從動(dòng)物組織中提取miRNA】
1.取20-40 mg組織,轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的研缽中,加液氮研磨成粉末。
請(qǐng)按下面說(shuō)明使用組織的量:
①RNA豐富的組織(如肝臟):不超過(guò)30 mg
②RNA含量低的組織(如肌肉):不超過(guò)100 mg
③當(dāng)使用的組織量小于20 mg時(shí):R-I,R- II和異丙醇的使用量都減半
④當(dāng)使用的組織量大于40 mg時(shí):R-I,R-II和異丙醇的使用量按比例增加
2.加入400 ul Buffer R- I,用裝有21-25號(hào)針頭的注射器反復(fù)抽吸8-10次,轉(zhuǎn)入1.5 m|離心管(試劑盒內(nèi)提供)中。
3.加入150 μl BufferR-1l,漩渦振蕩15-30 s,12,000X g離心5 min?!窘ㄗh在4℃下離心】
4.取上清至1.5 ml離心管中,加入180 u無(wú)水乙醇,混和均勻。
5.將制備管置于2 m|離心管(試劑盒內(nèi)提供)中,轉(zhuǎn)移步驟4中的混合液到制備管中,12,000X g離心1 min?!劲俳ㄗh在4℃下離心;②miRNA在濾液中,注意保存濾液?!?br>6.棄制備管,在濾液中加入500 μl異丙醇,混和均勻。
7.12,000X g離心10 min,棄上清。
8.加入700 μl 70%乙醇( - 20℃預(yù)冷),12,000Xg離心5min.
9.棄上清,室溫干燥5- 10 min。
10.離心管中加入70 ul Buffer TE (nucdease-free) 或RNase-free水洗脫miRNA。
【從植物組織中提取miRNA】
1.取30-150 mg組織,轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的研缽中,加液氮研磨成粉末。
請(qǐng)按下面說(shuō)明使用組織的量:
①植物葉子:通常用量10-80 mg
②植物纖維組織:通常用量100-150 mg
③當(dāng)植物葉組織量小于30 mg時(shí):R-I,R-II和異丙醉的使用量都減半
④當(dāng)植物葉組織量大于80 mg時(shí):R-I,R-II 和異丙醇的使用量按比例增加
⑤當(dāng)植物纖維組織量大于150 mg時(shí):R-I,R- II和異丙醇的使用量按比例增加
2.加入400 ul BufferR- I,用裝有21-25號(hào)針頭的注射器反復(fù)抽吸8-10次,轉(zhuǎn)入1.5 mI離心管( 試劑盒內(nèi)提供)中。.
3.加入150 ul Buffer R-1I,漩渦振蕩15-30 s, 12.000x g離心5 min?!?建議在4℃下離心】
4.取上清至1.5 ml離心管中,加入180 山無(wú)水乙醇,混和均勻。
5.將制備管置于2 mI離心管(試劑盒內(nèi)提供)中,轉(zhuǎn)移步驟4中的混合液到制備管中,12.000xg離心1 min.【①建議在4℃下離心;②miRNA在濾液中,注意保存濾液?!?br>6.棄制備管,在濾液中加入500 μl異丙醇,混和均勻。
7. 12,000xg高心10 min,棄上清。
8.加入700 ul 70%乙醇( - 20℃預(yù)冷),12,000xg離心5min.
9.棄上清,室溫干燥5 -10 min,
10.離心管中加入70 μl Buffer TE (nuclease-free) 或RNase-free水洗脫MiRNA。

【從細(xì)胞中提取miRNA】
步驟1-3根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的方式不同可以選擇a或b兩種實(shí)驗(yàn)方法
a.懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞或從培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶中獲得的細(xì)胞懸浮液或新鮮分離的動(dòng)物組織單細(xì)胞懸浮液:
1a.收集2X 10*-1X 10’的細(xì)胞,2,000Xg離心5 min,棄上清;
2a.加入400 μl BufferR- I,用裝有21-25號(hào)針頭的注射器反復(fù)抽吸8-10次,轉(zhuǎn)入1.5mI離心管(試劑盒內(nèi)提供)中;
3a. 加入150 μl Buffer R1I,旋渦振蕩15-30s,12.000X g離心5 min.【建設(shè)在4℃下離心】。
b. 96-孔L, 24-孔,12-孔或6-孔培養(yǎng)板上貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞:
1b.從96-孔, 24-孔,12-孔或6-孔培 養(yǎng)板里收集細(xì)胞,盡量棄去培養(yǎng)基,每孔加入400 u山l Buffer R-I,用移液槍上下吹打8-10次;
2b.轉(zhuǎn)移上述細(xì)胞懸浮液到1.5 ml離心管( 試劑盒內(nèi)提供)中,用裝有21-25號(hào)針頭的注射器反復(fù)抽吸8-10次;
3b. 加入150 μl Bufflr R-II, 漩渦振蕩15-30 s, 12,000X g離心5 min.【建議在4℃下離心】
4.取上清至1.5 ml離心管中,加入180 山無(wú)水乙醇,混和均勻。
5.將制備管置于2 ml離心管(試劑盒內(nèi)提供)中,轉(zhuǎn)移步驟4中的混合液到制備管中,12.000Xg離心1 min。【①建議在4℃下離心;②miRNA在濾液中,注意保存濾液?!?br>6.棄制備管,在濾液中加入500 u異丙醇,混和均勻。
7.12,000Xg高心10 min,棄上清。
8.加入700 μ 70%乙醇( - 20℃預(yù)冷),12,000xg離心5min.
9.棄上清,室溫干燥5 -10 min.
10.離心管中加入70 ul Bufer TE (nucdease-free )或RNase-free水洗脫mRNA。
三、流程圖


注意事項(xiàng):

Buffer R- I含刺激性化合物,操作時(shí)要戴乳膠手套和眼鏡,避免沾染皮膚、眼睛和衣服,謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要立即用大量清水或生理鹽水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢(xún)。

查看阿拉丁官網(wǎng)此產(chǎn)品相關(guān)對(duì)應(yīng)頁(yè)面:https://www.aladdin-e.com/zh_cn/M598102.html


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公司簡(jiǎn)介

上海阿拉丁生化科技股份有限公司是A股上市公司((股票代碼:688179),專(zhuān)注于科研試劑的研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售,已陸續(xù)建立多個(gè)工廠和研發(fā)中心。作為領(lǐng)軍企業(yè),阿拉丁始終堅(jiān)持質(zhì)量第一,連續(xù)13年被評(píng)為“最受歡迎試劑品牌”。 阿拉丁目前常備庫(kù)存試劑產(chǎn)品品種超過(guò)7萬(wàn)種,SKU總數(shù)超過(guò)46萬(wàn),產(chǎn)品線(xiàn)涵蓋了化學(xué)試劑、生化試劑、藥靶配體、蛋白質(zhì)和抗體等多個(gè)領(lǐng)域,是國(guó)內(nèi)少數(shù)化學(xué)試劑到生物試劑全面發(fā)展的國(guó)產(chǎn)試劑品牌,產(chǎn)品同步發(fā)布在我們國(guó)內(nèi)外電商平臺(tái)。
成立日期 2009-03-16 (16年) 注冊(cè)資本 14130.676萬(wàn)人民幣
員工人數(shù) 500人以上 年?duì)I業(yè)額 ¥ 1億以上
主營(yíng)行業(yè) 生物化工,化學(xué)試劑 經(jīng)營(yíng)模式 工廠,試劑
  • 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
VIP 1年
  • 公司成立:16年
  • 注冊(cè)資本:14130.676萬(wàn)人民幣
  • 企業(yè)類(lèi)型:股份有限公司(上市、自然人投資或控股)
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:化學(xué)試劑、藥靶配體、蛋白、抗體、材料科學(xué)等
  • 公司地址:上海市浦東新區(qū)新金橋路36號(hào)上海國(guó)際財(cái)富中心南塔16F
詢(xún)盤(pán)

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