產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,D-熒光素(底物)被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見(jiàn)下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞后,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過(guò)生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化,從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征。
常見(jiàn)商業(yè)化類型的差異(熒光素鉀,鈉,游離酸):
目前市場(chǎng)上有三種產(chǎn)品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素(鈉鹽),和D-熒光素(鉀鹽)。這三種產(chǎn)品主要差別在于溶解特性。
1)D-熒光素(游離酸)在水以及緩沖體系內(nèi)的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。
2)D-熒光素(鈉鹽)和D-熒光素(鉀鹽)能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無(wú)毒性,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。配成溶液后的三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)應(yīng)用上都沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的差別。
3)D-熒光素(鈉鹽)和D-熒光素(鉀鹽)基本上沒(méi)有差別,主要是使用習(xí)慣等因素影響。整體來(lái)看,鉀鹽的應(yīng)用文獻(xiàn)明顯多于鈉鹽。
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