無血清細(xì)胞凍存液（治療級(jí)）是埃澤思生物（Applied Cell ? ）自主開發(fā)的一款無血清、無需程序降

溫的細(xì)胞凍存液，適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞的凍存。該款凍存液內(nèi)毒素水平遠(yuǎn)低于藥典規(guī)

定標(biāo)準(zhǔn)，適用于生產(chǎn)型細(xì)胞凍存；同時(shí)該款凍存液所有成分均為原料藥級(jí)別，生產(chǎn)過程遵循 ISO9001 體

系,嚴(yán)格執(zhí)行 cGMP 操作標(biāo)準(zhǔn)，符合細(xì)胞治療標(biāo)準(zhǔn)。

產(chǎn)品特性

1、 無動(dòng)物源成分，無各類病毒、霉菌和支原體等污染的可能性

2、 熱源水平低于藥典標(biāo)準(zhǔn) 1/10，減少外源內(nèi)毒素干擾

3、 無血清成分，所有成分均為原料藥級(jí)別，極大降低批次間差異

4、 凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高達(dá) 95%

5、 即用型產(chǎn)品，無需程序降溫,凍存于-80℃冰箱或液氮中長期保存

操作方法：

1. 選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞凍存，有助于提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。

1.1. 按照常用方法懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞收集于離心管中。

1.2. 1200 rpm，5min 離心，棄上清液。

1.3. 加入適量的無血清細(xì)胞凍存液于離心管中，推薦細(xì)胞凍存濃度為 5×10 6 - 5×10 7 cells/ml。緩慢

混合均勻，制成細(xì)胞懸液。

1.4. 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。

1.5. 直接將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱，24h 后轉(zhuǎn)入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存。

細(xì)胞復(fù)蘇操作方法

1.6. 從液氮罐取出凍存細(xì)胞，立即放入 37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中，快速融化。

1.7. 準(zhǔn)備離心管，加入 2 倍凍存細(xì)胞體積的細(xì)胞培養(yǎng)基，待凍存管中細(xì)胞完全融化后，將凍存細(xì)胞懸

液緩慢加入離心管中。

1.8. 1200 rpm 5min 離心，棄上清。

1.9. 加入適量新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩慢懸浮細(xì)胞，并將細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中，顯微鏡下觀

察細(xì)胞狀態(tài)，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24h 后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。