吖啶鹽和相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢(shì)的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物,穩(wěn)定性,活性和敏感性超過(guò)了那些放射性同位素。吖啶酯(試劑盒所提供)能與任何含有氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)(見(jiàn)圖1)。在堿性條件下,NHS將會(huì)離去,吖啶酯將會(huì)以一個(gè)穩(wěn)定的酰胺鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合形成吖啶化合物。反應(yīng)完成后,多余的吖啶鹽通過(guò)脫鹽柱除去。在存在堿性過(guò)氧化氫,吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。加入激發(fā)試劑后,體系立即釋放光子,可以用430nm標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)檢測(cè)。這個(gè)發(fā)光過(guò)程是十分短暫(整個(gè)過(guò)程的發(fā)生小于2秒),觸發(fā)方案必須增加內(nèi)部光度計(jì)和光子探測(cè)器。蛋白質(zhì),多肽,抗體,核酸都可以用吖啶標(biāo)記。標(biāo)記化合物在堿性過(guò)氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光,通過(guò)收集光子可以檢測(cè)到標(biāo)記化合物。 主要用途:化學(xué)發(fā)光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測(cè)等研究。
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