碧云天生產(chǎn)的BL21(DE3) PLysS超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞,英文名BL21(DE3) PLysS Super Competent Cells,是一種可以用于IPTG誘導(dǎo)下重組蛋白表達(dá)的E. coli BL21(DE3) PLysS即用型化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞。使用pUC19質(zhì)粒進(jìn)行熱激活轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化效率可以高達(dá)1×108cfu/μg DNA以上。
BL21(DE3)是BL21被λ噬菌體DE3溶原化的衍生菌株,在lacUV5啟動(dòng)子控制下可表達(dá)噬菌體T7 RNA聚合酶(相關(guān)基因序列已經(jīng)整合到細(xì)菌染色體中)。IPTG可以誘導(dǎo)BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表達(dá),因此BL21(DE3)菌株適合T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng),比如常見的原核表達(dá)載體pET系列[1]。
BL21(DE3) PLysS菌株攜帶pLysS,具有氯霉素抗性,可以表達(dá)能抑制T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶(T7 lysozyme),從而可以抑制T7 RNA聚合酶在目的蛋白被IPTG誘導(dǎo)前的本底表達(dá),即導(dǎo)致本底性的外源重組蛋白的表達(dá)被有效抑制。這種情況下特別適合于影響細(xì)胞生存和活力的外源毒性蛋白的表達(dá)。
BL21(DE3) PLysS菌株基因型:F- ompT hsdSB(rB-, mB-) gal dcm(DE3)pLysS Camr。
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